RESUMO -O objetivo deste estudo foi a preparação de um suporte iônico por ativação de hidrogel de quitosana com glutaraldeído e modificação química com glicina (Qui-Glu-Gli) para ser usado na imobilização de lipase de Thermomyces lanuginosus (LTL) via adsorção iônica. O efeito do pH de imobilização e carga de proteína nos parâmetros de imobilização foi avaliado. Máxima adsorção de LTL (≈53 mg/g) e atividade hidrolítica do biocatalisador preparado na hidrólise de azeite de oliva emulsificado (≈1000 UI/g de suporte) foi observada em pH 4,0. O processo de adsorção foi espontâneo nas condições testadasvalores de energia livre de Gibbs (∆G) entre -17,7 e -10,1 kJ/mol. Estes resultados indicam a satisfatória aplicação do suporte preparado na imobilização de lipase devido à alta retenção de proteína.
Com o objetivo de minimizar os impactos ambientais causados pelas indústrias têxteis, foi proposto um estudo de adsorção de azul de metileno em partículas de epicarpo de macaúba, um adsorvente de baixo custo e de fácil obtenção. Neste estudo, foi avaliada a influência da concentração de corante no processo de adsorção. Estudos isotérmicos foram também realizados com o propósito de elucidar o processo de adsorção. O modelo de isoterma de Sips melhor representou os dados experimentais (R 2 = 0,994). O adsorvente estudado mostrou ser um adsorvente eficiente, obtendo uma capacidade máxima de adsorção de 75,1 ± 1,8 mg/g.
RESUMO -O objetivo do trabalho foi avaliar, empregando diferentes meios de cultura, a produção em Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta da molécula híbrida recombinante PspA-FL-PdT, um candidato vacinal para Streptococcus pneumoniae. Foram utilizados os meios definidos HDFGlu e HDFGly, induzidos por IPTG, o meio definido de autoindução SDAB e o meio complexo de autoindução com fitona (AIPhy). Os cultivos foram mantidos sob agitação de 250 RPM e 30°C durante a indução. Amostras foram retiradas para acompanhamento do crescimento e avaliação da produção da proteína recombinante, a qual foi feita por SDS-PAGE e densitometria das bandas do gel. O melhor resultado foi encontrado no cultivo realizado com o meio HDFGly, apresentando produção de 64 mg/L de PspA-FL-PdT. Quando comparados outros parâmetros, o HDFGly também apresenta vantagens, como maior produção em relação ao custo e tempo de cultivo.
RESUMO -O objetivo do trabalho foi avaliar em diferentes meios de cultura a produção na fração solúvel de um promissor antígeno vacinal e discriminatório para diagnóstico de zika: o domínio III da proteína de envelope desse vírus (EDIII ZIKV). Foram feitos cultivos com meios quimicamente definidos HDF e S-DAB e complexos HDM, TB, e AI. Amostras foram retiradas antes da indução e a cada hora após a indução até o final do crescimento celular. Após ajustar as concentrações celulares das amostras, realizou-se a lise das células e a fração solúvel foi separada por centrifugação para a análise por eletroforese. A densitometria das bandas foi utilizada para comparar a produção de EDIII nos diferentes meios. O meio que apresentou maior produção na fração solúvel foi meio TB, que com 16h de cultivo, apresentou uma densidade relativa de banda de 26%.
RESUMO -O objetivo desse estudo foi a avaliação da solubilidade da proteína pneumolisina geneticamente destoxificada (PdT) recombinante obtida em Escherichia coli produzida nos meios de cultura LB e HDF induzidos por IPTG, S-DAB e de autoindução (AI) induzidos por lactose. Durante os cultivos, alíquotas foram retiradas a cada hora para a leitura da densidade óptica (DO) a 600 nm, os pellets foram ressuspendidos de modo que a concentração celular fosse a mesma em todas as amostras. As suspensões foram lisadas e centrifugadas para separação da fração solúvel e insolúvel. A produção da PdT foi avaliada através da densitometria de banda dos géis de SDS-PAGE. Os meios complexos LB e AI apresentaram produção solúvel semelhante, enquanto os meios definidos HDF e S-DAB levaram à formação de corpos de inclusão. Devido às suas características, o meio AI é a melhor opção para a produção de PdT solúvel em biorreator.
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