Une série d'expériences a été conduite pour la mise au point d'une technique de cryoconservation du sperme chez la truite arc-en-ciel. Le dilueur de congélation de Mounib (1978), additionné de 10 % de jaune d'œuf et de 10 % de DMSO, a été retenu et les conditions d'utilisation qui autorisent la meilleure conservation du pouvoir fécondant sont les suivantes : congélation en pellets de 100 µl ou en paillettes de 250 µl) pour un abaissement de température de 10 à 40° C/minute, décongélation rapide en une dizaine de secondes. Cependant les spermatozoïdes subissent incontestablement des dommages durant le processus de congélation et leur nombre lors de l'insémination doit être augmenté pour égaler les pourcentages de fécondation obtenus avec le sperme frais ; néanmoins, les spermatozoïdes fécondants conduisent à un développement embryonnaire et post-embryonnaire normal. Une baisse de l'aptitude à la congélation a été constatée en fin de période de spermiation ; celle-ci a été reliée à des phénomènes de vieillissement du sperme et peut être compensée par la mise en pool des spermes de plusieurs mâles. Nous avons constaté d'autre part qu'après décongélation les spermes les plus motiles sont les plus fécondants, condants.
This paper reports a series of experiments conducted to improve a procedure of sperm cryopreservation in rainbow trout. The Mounib's medium (1978), to which was added 10 % egg yolk and 10 % DMSO, was chosen and the best preservation of the fertilizing ability was obtained under the following conditions : dilution ratio 1/3, freezing in pellets (100 µl) or in straws (250 µl) with a freezing rate of 10 to 40° C/min, quick thawing (in 10 s.). However, the spermatozoa were undoubtly damaged during the freezing procedure and their number at the moment of insemination had to be raised to approximate the same fertilization rate as that of the non frozen sperm ; nevertheless, the fertilizing spermatozoa lead to a normal embryonic and post-embroyonic development. A decrease in the freezing ability was observed at the end of the period of spermiation ; this may be put in relation with sperm ageing and can be compensated for by pooling the semen of several males. It was also observed that after thawing the most motile sperm exhibited the highest fertilization rate
RÉSUMÉLa conservation du sperme de truite arc-en-ciel prélevé 1 mois et demi après le début de la spermiation a été testée in vitro à l'air ou sous atmosphère d'Oî et à température ambiante (9° C) pendant 24 h. Le pouvoir fécondant a été mesuré par le pourcentage d'oeufs embryonnés à 300 degrés-jours. Le sperme a été dilué au 1 /1000 (10 -3 ) pour inséminer des ovules prélevés à chaque test sur un groupe de 10 femelles. En conditions de stockage sous air la fertilité chute plus rapidement que sous O2(P<0,05 à 12 h). Dans les deux cas, le pouvoir fécondant initial ne se maintient que pendant 6 h. Cette durée de conservation paraît relativement brève en comparaison avec les données de la littérature mais les taux de dilution élevés employés dans cette expérience ont probablement permis de déceler des phénomènes de vieillissement intervenant précocement en condition de conservation in vitro. Le stockage des ovules sous oxygène n'améliore que très légèrement leur survie par rapport à une conservation dans le liquide ccelomique. SUMMARY Short-term storage of rainbow trout gametes in vitro under oxygen.The storage of rainbow trout sperm, taken 1 1/2 months after the onset of spermiation, was tested in vitro in the air and under O2 at a room temperature of 9° C for 24 hrs. Fertilizing ability was assessed by the percentage of eyed-eggs at 300 degreesdays. Sperm was diluted to 1 /1000 (10~3) to inseminate ova, taken for each test, from a group of females. When the sperm was stored in the air, the fertility rate dropped more rapidly than when it was kept under O2 (P < 0,05 at 12 hrs). In both cases, initial fertilizing abilitywasonlymaintained for 6 hrs.This storage time is rather brief as compared to data in the literature but the high dilution rates used in this experiment probably allowed us to detect the aging processes occuring early in in vitro storage.Ovum survival at 9° C under O2 was only slightly improved as compared to survival in ccelomic fluid.
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