Cryoconservation du sperme de truite arc-en-ciel (Salmo gairdneri R.)

Abstract

Une série d'expériences a été conduite pour la mise au point d'une technique de cryoconservation du sperme chez la truite arc-en-ciel. Le dilueur de congélation de Mounib (1978), additionné de 10 % de jaune d'œuf et de 10 % de DMSO, a été retenu et les conditions d'utilisation qui autorisent la meilleure conservation du pouvoir fécondant sont les suivantes : congélation en pellets de 100 µl ou en paillettes de 250 µl) pour un abaissement de température de 10 à 40° C/minute, décongélation rapide en une dizaine de secondes. Cependant les spermatozoïdes subissent incontestablement des dommages durant le processus de congélation et leur nombre lors de l'insémination doit être augmenté pour égaler les pourcentages de fécondation obtenus avec le sperme frais ; néanmoins, les spermatozoïdes fécondants conduisent à un développement embryonnaire et post-embryonnaire normal. Une baisse de l'aptitude à la congélation a été constatée en fin de période de spermiation ; celle-ci a été reliée à des phénomènes de vieillissement du sperme et peut être compensée par la mise en pool des spermes de plusieurs mâles. Nous avons constaté d'autre part qu'après décongélation les spermes les plus motiles sont les plus fécondants, condants. <br> This paper reports a series of experiments conducted to improve a procedure of sperm cryopreservation in rainbow trout. The Mounib's medium (1978), to which was added 10 % egg yolk and 10 % DMSO, was chosen and the best preservation of the fertilizing ability was obtained under the following conditions : dilution ratio 1/3, freezing in pellets (100 µl) or in straws (250 µl) with a freezing rate of 10 to 40° C/min, quick thawing (in 10 s.). However, the spermatozoa were undoubtly damaged during the freezing procedure and their number at the moment of insemination had to be raised to approximate the same fertilization rate as that of the non frozen sperm ; nevertheless, the fertilizing spermatozoa lead to a normal embryonic and post-embroyonic development. A decrease in the freezing ability was observed at the end of the period of spermiation ; this may be put in relation with sperm ageing and can be compensated for by pooling the semen of several males. It was also observed that after thawing the most motile sperm exhibited the highest fertilization rate

The ageing phenomenon of turbot spermatozoa: effects on morphology, motility and concentration, intracellular ATP content, fertilization, and storage capacities

“…At 4 C, storage capacities of sea bass sperm decreased from 70 h at the beginning of the spawning season, to 30 min in the middle and end of this period (Billard et al, 1977). The fertilizing capacity of frozen-thawed rainbow trout spermatozoa declined as the season advanced (Legendre & Billard, 1980). A similar decrease is suggested in sea trout Salmo trutta (L.), and Atlantic salmon (Stoss & Refstie, 1983).…”

Cryopreservation of sperm in marine fish

“…The presence of reduced gluthathione prevents the deleterious effects of free radicals ( Maracine & Segner 1998) and avoids peroxidation of lipids, protecting the sperm membranes ( Ogier de Baulny 1997). The Mounib diluent was also used successfully for spermatozoa of freshwater fish ( Mounib 1978; Legendre & Billard 1980). But Mounib's medium was not appropriate for freezing Atlantic croaker Micropogonias undulatus L. spermatozoa ( Gwo, Strawn, Longnecker & Arnold 1991).…”

Motility activation and metabolism characteristics of spermatozoa of the black-lip-pearl oyster Pinctada margaritifera var: cumingii (Jameson, 1901)

“…75% to 100% of spermatozoa are motile [21]. To prevent sticking of the spermatozoa to the glass slide, BSA (bovine serum albumin) was added to the swimming medium at the concentration of 0.5%.…”