p a r Claude Gros, Michel Privat de Garilhe, Antigone Costopanagiotis et Robert Schwyzer (5 X 61)Dans une prCcCdente notel) nous avions signal6 l'existence, dans la poudre d'hypophyse posterieure de Porc, d'un tripeptide auquel nous avions attribuC la structure provisoire leucyl-arginyl-leucine (Leu-Arg-Leu) . Ce peptide avait 6th obtenu au cours de 1'Clectrophorbse de zone selon la mkthode de PORATH et ~1 .~) de la fraction des peptides basiques de l'hypophyse postkrieure contenant notamment l'hormone a-mClanophore-stimulante (a-MSH) et une hypophyso-stimuline B effet corticotrope ou act-Corticotropin-Releasing-Factor )) (a-CKF) .La prCsente communication a pour but de d6crire l'isolement B l'6tat pur et en quantite significative, du tripeptide Leu-Arg-Leu, la dktermination de sa structure et sa synthke.Pr@aration du peptide (en. L'cxtraction dc la poudre de lobes postdricurs d'hypophyses de Porc, la prdcipitation fractionnee ?L l'acdtone et la distribution B contre-courant ont CtC dCcrites dans dcs publications antdrieures l) 4 ) . On a vu quc, au cours de la distribution B contre-courant comportant 25 transferts, les peptidcs basiques sc trouvaient dans une fraction dite ((fraction Hr qui correspondait aux tubes 18-24. Une 6lectrophor8se analytique de cette fraction H sur papier WHATMAN 3 MM dans le systkme acide acdtique-pyridine 0 . 2~ (pH 5,l) permet de distinguer aprks rCv6lation au bleu de bromothymol ct 5 la ninhydrine au moins 7 taches distinctes numdro-tCes a, b, c, d, e, f et g, dans l'ordre dc lcurs charges Clectropositives croissantes. La tache ter est celle qui nous intdresse actuellement, L savoir le tripeptide Leu-Arg-Lcu.Afin dc prdparer ce tripeptide en quantit6 importante ct B l'Ctat pur, on fait subir B la fraction H encore 2 traitcments successifs: Une quantit6 de l'ordre de 500 mg de fraction H subit m e seconde distribution 3, contrecourant dans un systbme constitui! par une phase aqueusc 10-2, en acide p-toluknesulfonique ct M en Cthyl&nediaminc-tdtrac6tate de sodium, et une phase organique qui est du m-butanol.On effectue 25 transferts B tempdrature ordinaire, et on repartit les tubes obtenus en trois lots. Apr8s dlimination de I'acide p-toluknesulfonique ct de 1'6thylirnediamine-tdtracdtate par adsorption sur Amberlitc IRA 400, on obtient ainsi 3 sous-fractions: H, tubes 1 B 11 (241,6 mg) H, tubes 12 B 21 (98,2 mg) H, tubes 22 B 26 (39,7 mg)La fraction H,, dont la richesse en tripeptide peut dtre constatde par Clcctrophor6se sur papier, subit une 6lectrophorbse de zones sur colonnea). Le support de l'Clectrophor6se est une colonne de Pevikon 870 C 5 ) de 45 x 0,9 cm. L'dlectrophorbse a lieu en tampon acide ac6tique-pyridine 0,2 M pH 5,0 sous 300 volts et 8 mA. La partie centrale de 1'Clution est repr6sentCe par la figure 1. Ide contenu des tubes 2540, une fois lyophilis6, fournit 8 mg d'une poudre blanche qui ne contient
