In neurobiological studies, crucial is the selection of most appropriate and informative experimental methods, one of which is immunohistochemistry. This review briefly summarizes the experience of adaptation of immunohistochemical methods to nervous system studies accumulated over years the Laboratory of Functional Morphology of the Central and Peripheral Nervous System (Institute of Experimental Medicine). The aim of this work was to determine the most effective and reliable immunomarkers for neurobiological studies. The article contains theoretical basis and practical recommendations for use of key cytospecific and functional markers used in studies of structural and functional organization of brain and spinal cord of mammalian animals and human. In particular, the results of immunohistochemical reactions to neural markers (NeuN, neurofilament proteins, alpha-tubulin, alpha-synuclein), neurotransmitter synthesizing enzymes (tyrosine hydroxylase, glutamate decarboxylase, choline acetyltransferase, NO synthase) and glial markers (GFAP, glutamine synthetase, Iba-1, vimentin) are demonstrated. The presented methodology is useful for experimental neurobiology and clinical morphological diagnostics.

Амилоидные (сенильные) бляшки -нерастворимые внеклеточные агрегаты β-амилоидного пептида, которые формируются в головном мозге человека как в ходе нормального старения, так и при развитии старческой деменции альцгеймеровского типа.Целью данной работы стало изучение особенностей выявления амилоидных бляшек в коре головного мозга пожилых людей методами гистохимии и иммуногистохимии.Материал и методы. Материалом для исследования служили образцы коры головного мозга людей обоих полов (79-98 лет, n = 23). Для гистохимического выявления амилоида применяли окраску Конго красным и альциановым синим. Для иммуногистохимической идентификации амилоидных бляшек использовали конформационно-специфические OC-антитела, для выявления астроцитов -антитела к глиальному фибриллярному кислому белку (GFAP). Для одновременного выявления амилоидных бляшек и астроцитов ставили двойную иммунофлуоресцентную реакцию OC/GFAP.Результаты. Показано, что применение классических гистохимических методик оказывается неэффективным для идентификации амилоидных бляшек в мозге пожилых людей, позволяя выявлять лишь единичные скопления амилоида. Иммуногистохимическая реакция с применением антител к конформационным эпитопам амилоидных фибрилл позволяет идентифицировать многочисленные амилоидные бляшки и изучать их морфологию. Иммуногистохимическая реакция на GFAP, являющийся маркерным белком астроцитов, также подходит для первичного анализа имеющихся образцов мозга на наличие или отсутствие амилоидный бляшек. Разработанный нами в рамках представленной работы протокол двойной иммунофлуоресцентной реакции OC/GFAP позволяет с высокой специфичностью выявлять одновременно и амилоидные бляшки, и астроциты. Это дает возможность изучать пространственную взаимосвязь данных элементов, а также строить 3D-реконструкции, дающие наиболее полную информацию о структурных особенностях и взаимном расположении астроцитов и амилоидных бляшек.Ключевые слова: амилоид, амилоидные (сенильные) бляшки, болезнь Альцгеймера, Конго красный, альциановый синий, антитела к конформационным эпитопам амилоидных фибрилл (OC-антитела), GFAP.

No abstract

The aim of this study was to evaluate the morphological and functional characteristics of microglial cells in the rat striatum at different stages of postnatal development. Using immunocytochemical methods and fluorescent microscopy, brain sections were analysed at each of the following postnatal ages: day 7 (n = 4), day 14 (n = 3), 4 to 6 months (n = 3). Different morphological and functional types of microglial cells were identified and characterized in details. It was noted that microglia activated during normal brain development do not contain vimentin, which is characteristic of stroke-activated microglia.