Este experimento testou a viabilidade espermática de sêmen canino diluído em meio, à base de leite desnatado, glicose e antibióticos, resfriado e armazenado a 4°C, durante 24 e 48 horas em contêiner para transporte. No Laboratório de Reprodução Animal Assistida (Reproscenter), na Faculdade de Veterinária da UFF, foram selecionados 10 reprodutores, com média de idade de 2,26 anos, provenientes de canis da região de Niterói e Rio de Janeiro para avaliação dos seus ejaculados. As médias das amostras avaliadas imediatamente após a colheita demonstraram boa qualidade do sêmen: 6,5 pH; 86,5% motilidade; 4,5 vigor; 117,10x10 6 /ml concentração; 91,7% total de espermatozóides (Sptz) vivos e 74,7% Sptz normais. Com 24 horas de resfriamento, as médias foram de 79% motilidade; 4,3 vigor e 86,9% total Sptz vivos. Com 48 horas, 73% motilidade; 4,2 vigor e 79,7 Sptz vivos. Os resultados demonstram a eficácia do diluidor testado, de fácil preparo, conservação, baixo custo e que pode ser utilizado por veterinários em clínicas e criatórios, com o mínimo de equipamento para diluição, refrigeração e transporte do sêmen canino à longa distância, armazenado até 48 horas em contêiner.