RESUMOA imobilização de enzimas é uma alternativa para sua reutilização e redução de custos em processos industriais. O bagaço de cana-de-açúcar pode ser um suporte viável, pois é atóxico e tem baixo custo. A beta-glicosidase hidrolisa ligações beta-glicosídicas e pode ser aplicada em vários setores. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o bagaço de cana-de-açúcar submetido a tratamentos químicos e térmico para imobilização de beta-glicosidase de soja. O bagaço foi tratado com NaOH, etanol 70%, calor úmido a 121 ºC por 15 min e ativação com glutaraldeído 2,5%. A beta-glicosidase de soja foi obtida por ultrafiltração em membranas de 100 e 10 kDa. Os maiores rendimentos de imobilização da beta-glicosidase (68,3%) foram obtidos utilizando bagaço ativado com glutaraldeído e quando esta ativação foi precedida pelos tratamentos com NaOH e autoclavagem (76,1%). As médias de proteína e enzima imobilizada obtidas pelos tratamentos do bagaço não diferiram significativamente entre si (p≥0,05). Palavras-chave:Imobilização, β-glicosidase, soja, bagaço de cana-de-açúcar. INTRODUÇÃONos últimos anos, a utilização de enzimas na indústria cresceu devido às vantagens frente aos catalisadores químicos, tais como elevada atividade catalítica, especificidade por determinado substrato e elevada atividade em condições brandas de temperatura e pressão 1 . A beta-glicosidase (beta-D-glicosídeo-glicohidrolase, EC 3.2.1.21) pertence a um grupo de hidrolases capazes de clivar as ligações beta-glicosídicas de di e/ou oligossacarídeos, ou outros conjugados glicosídicos. Esta enzima, amplamente distribuída na natureza, tem papel fundamental em muitos processos biológicos como a degradação de biomassa celulósica, hidrólise de glicolipídeos, cianogênese e modificação de metabólitos secundários, como as isoflavonas 2 . Entretanto, a dificuldade de recuperação da forma solúvel da enzima do meio reacional para posterior aplicação e o alto custo são desvantagens do emprego de enzimas 3 . A fim de se contornar essas desvantagens, a imobilização de enzimas em suportes sólidos insolúveis com retenção de sua atividade catalítica é uma estratégia pesquisada para tornar essas biomoléculas

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RESUMOAs β-glicosidases podem ser aplicadas em diversos processos biotecnológicos. Entretanto, na literatura há relatos de diferentes metodologias para determinação de sua atividade. Assim, o objetivo deste trabalho foi comparar três metodologias de determinação de atividade de β-glicosidase em amostras de soja. A β-glicosidase de cotilédones de soja foi extraída com tampão fosfato citrato 0,1 M, pH 6,6. Foi realizado um planejamento experimental inteiramente casualizado, com cinco repetições, e as metodologias testadas foram A: reação com 1mM de ρ-NPG, tampão fosfato citrato em 30 mim a 30 ºC e Na 2 CO 3 ; B: reação com 5mM de ρ-NPG, tampão fosfato de sódio em 15 min a 37 ºC e tampão fosfato de sódio e C: reação com 5mM de ρ-NPG, tampão fosfato citrato em 15 min a 37 ºC e tampão fosfato de sódio. As metodologias mais eficientes foram B e C com resultados de atividade 5 vezes superior aos da metodologia A.Palavras-chave: β-glicosidase, soja, metodologia. INTRODUÇÃOAs β-glicosidases (BGLs) apresentam importância em inúmeras aplicações biotecnológicas. Formam um grupo altamente heterogêneo em enzimas hidrolíticas 1 . Tais enzimas são encontradas em diversos organismos, como bactérias, fungos, plantas e animais 2 com reação catalisada pela hidrolise de ligações β-glicosídicas de di e/ou oligosacarídeos liberando glicose. As BGLs possuem inúmeras funções endógenas nos vegetais, podendo ser utilizadas na hidrólise de isoflavonas glicosídicas (genistina, daidzina e glicitina) em agliconas (genisteína, daidzeína e gliciteína) que apresentam ação benéfica na saúde humana, atuando no controle e prevenção de doenças crônicas 2 . Assim podem ser aplicadas em diversos setores industriais, principalmente na indústria de alimentos. A demanda por enzimas mais estáveis, altamente ativas e específicas tem aumentado, a clonagem molecular de genes codificantes para BGLs representa uma poderosa ferramenta para a produção de proteínas em grande escala e também oferece a possibilidade da aplicação de métodos de engenharia de proteínas e no melhoramento de suas funções 3 . Além disso, a utilização de BGLs imobilizadas em vários suportes tem destaque, em virtude da possibilidade de reutilização das enzimas, operação contínua e controle da formação do