No abstract

ÖZETFlukonazolün profilaksi ve sağaltımda yaygın ve tekrarlayan kullanımı Candida albicans suşlarında direnç gelişimine yol açmıştır. Çalışmamızda, flukonazole dirençli ve duyarlı C.albicans izolatlarında atım pompalarını kodlayan CDR1, CDR2 ve MDR1 genlerinin ekspresyonu araştırılarak flukonazol direncinde bu mekanizmanın rolünün belirlenmesi amaçlanmıştır. Çalışmaya, flukonazole dirençli beş, flukonazole duyarlı altı ve kısmi inhibisyon etkisi gösteren duyarlı dört C.albicans suşu dahil edilmiştir. Suşların flukonazol ve diğer antifungaller için MİK değerleri mikrodilüsyon yöntemiyle belirlenmiştir. Dirençli suşların flukonazol duyarlılıkları ayrıca, siklosporin A içeren ve içermeyen maya özütlü pepton dekstroz agarda E-test ile de incelenmiştir. CDR1, CDR2 ve MDR1 genlerinin ekspresyon düzeyleri, gerçek zamanlı PCR yöntemi ile araştırılmıştır. Bu genlerin ekspresyonu ACT1 seviyeleri ile normalize edilmiş ve flukonazole duyarlı C.albicans ATCC 14053 kontrol suşu ile karşılaştırılmıştır. Tüm suşların amfoterisin B'ye duyarlı ve bir izolat hariç tümünün klotrimazole de duyarlı olduğu görülmüştür. Flukonazole dirençli beş suşun üçü ve kısmi inhibisyon etkisi gösteren dört suşun üçü 5-flusitozine dirençli, duyarlı suşların ise biri hariç tümü 5-flusitozine orta duyarlı olarak bulunmuştur. Flukonazole dirençli suşların, biri hariç tümünün itrakonazol ve ketokonazole dirençli, mikonazol için ise ≥ 64 µg/ml MİK değerlerine sahip oldukları belirlenmiştir. Flukonazole duyarlı tüm suşlar ketokonazole duyarlı, itrakonazole doza bağımlı duyarlı bulunmuştur. Flukonazole dirençli ve duyarlı suşların vorikonazole duyarlı olduğu belirlenmiştir. Kontrol suşu ile karşılaştırıldığında; flukonazole dirençli beş suşun ikisinin yüksek, üçünün orta düzeyde CDR1/2 ve birinin yüksek, üçünün ise düşük düzeylerde MDR1 gen ekspresyonu yaptığı tespit edilmiştir. Kısmi inhibisyon etkisi gösteren duyarlı suşlardan birinde görülen yüksek MDR1 ekspresyonu dışında, orta düzeylerde CDR1, CDR2 ve MDR1 fazla ekspresyonu gözlenirken, duyarlı izolatlar üç suş dışında atım pompalarını düşük düzeylerde eksprese etmiştir. CDR1 ve CDR2 ekspresyon düzeylerinin aynı suş için tüm izolatlarda paralel olduğu belirlenmiştir. Çalışmamıza alınan flukonazole dirençli C.albicans izolatlarında atım pompa genlerinin fazla ekspresyonunun dirençten sorumlu önemli bir mekanizma olduğu sonucuna varılmıştır.

No abstract

Objective: The aim of the present study was to investigate and compare the phospholipase B1, B2, C1 and D1 activities in C.albicans strains isolated from blood cultures and oral cavity specimens. Method: Phospholipase activity of the strains was examined by plate method and reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PZT). Results: Twenty-six (86.7%) strains isolated from blood and 24 (80.0%) from oral cavities revealed phospholipase activity by plate method. No statistically significant difference (χ2 =0.48; p=0.49) was observed between the groups. However statistical difference was determined between the mean Pz values (0.6138±0.9823; 0.6988±0.9910) (p=0.007). PLB1 expression was detected in all (100%), PLB2 in 29 (96.7%) and 30 (100.0%), PLC1 in 27 (90%) and 22 (73.3%), PLD1 in 27 (90.0%) and 21 (70.0%) of blood and oral strains, respectively. While no significant difference was detected between PLB1 expression values of the groups (t=-0.307; p=0.760), PLB2 and PLC1 expressions were found to be significantly higher in blood (p=0.043) and oral cavity isolates (p<0.001), respectively. No difference was observed between PLD1 expressions (p=0.732). PLB1, PLB2, PLC1 and PLD1 expressions were 100%, 81.7%, 71.6% and 76.7% in agreement with the plate method. The agreement was 83.3% when all the phospholipase genes were considered. No correlation was detected between the Pz values and phospholipase expressions (p=0.602; p=0.555; p=0.241; p=0,096, respectively). Conclusion: The high rates of phospholipase activity of the C.albicans isolates in our study, support the important roles of these enzymes in virulence. Our results may indicate that phospholipase enzymes encoded by PLB2 and PLC1 genes play more important roles for invasive and oral cavity infections, respectively; however large scale studies are needed on this issue.

No abstract