Реферат: Внаслідок поширеного розвитку допоміжних репродуктивних технологій актуальним є вдосконалення способів кріоконсервування сперміїв. У роботі досліджено показники морфофункціонального стану кріоконсервованих сперміїв людини в нормі та при патології за різних способів відтавання. Усі зразки витримували над дзеркалом рідкого азоту, подальший нагрів сперміїв здійснювали на водяній бані (37, 50, 60, 70°С) та витримували за кімнатної температури до появи рідкої фази. Морфофункціональний стан сперміїв оцінювали за їхньою рухливістю та життєздатністю, а стан хроматину -за допомогою акридину оранжевого. Встановлено, що режим відтавання при 50°С (із попередньою інкубацією зразків у парах рідкого азоту (-150°С)) після кріоконсервування сперміїв за 3-етапною програмою ефективно зберігає їх рухливість без змін цілісності мембрани та стану нуклеарного хроматину в нормі та при астенозооспермії. Відтавання зразків при кімнатній температурі за тих же умов є найбільш травматичним для сперміїв у випадку як нормо-, так і астенозооспермії.Ключові слова: спермії людини, кріоконсервування, відтавання, рухливість, деконденсація, хроматин.Реферат: Вследствие широкого развития вспомогательных репродуктивных технологий актуальным является совер-шенствование способов криоконсервирования спермиев. В работе исследованы показатели морфофункционального состоя-ния криоконсервированных спермиев человека в норме и с патологией при различных способах оттаивания. Все образцы выдерживали над зеркалом жидкого азота, дальнейший нагрев спермиев осуществляли на водяной бане (37, 50, 60, 70°С) и выдерживали в условиях комнатной температуры до появления жидкой фазы. Морфофункциональное состояние сперма-тозоидов оценивали, подсчитывая подвижность и жизнеспособность, а состояние хроматина клеток -с помощью акридина оранжевого. Установлено, что режим оттаивания спермиев при 50°С (с предварительной инкубацией образцов в парах жидкого азота (-150°С)) после криоконсервирования по 3-этапной программе эффективно сохраняет их подвижность без изменений целостности мембраны и состояния нуклеарного хроматина при нормо-и астенозооспермии. Оттаивание образцов при комнатной температуре в тех же условиях является наиболее травматичным для спермиев человека в слу-чае как нормо-, так и астенозооспермии.Ключевые слова: спермии человека, криоконсервирование, оттаивание, подвижность, деконденсация, хроматин.Abstract: Due to the widespread development of assisted reproductive technologies an actual task is to improve current methods of sperm cryopreservation. We studied the morphological and functional states of the cryopreserved human sperm in normal and pathological conditions at different regimens of thawing. All samples were maintained above the mirror of liquid nitrogen with further heating of spermatozoa in a water bath (37, 50, 60, 70°C) or maintaining at room temperature until the liquid phase appearance. Morpho-functional state of sperm was estimated by their motility and viability. Assessment of sperm chromatin was carried out using acridine orange staining. ...

Реферат: Низькотемпературне консервування сперматозоїдів широко використовується при лікуванні безпліддя методами допоміжних репродуктивних технологій (ДРТ). Методи кріоконсервування сперматозоїдів із еякулятів при нормозооспермії є рутинними, проте їх неможливо використовувати для сперматозоїдів, отриманих із еякулятів при вадах сперматогенезу. Розроблення методів кріоконсервування та оцінка морфофункціональних та ультраструктурних характеристик сперматозоїдів після кріоконсервування є актуальними. У роботі оцінювали вплив кріоконсервування методом вітрифікації з використанням непроникальних кріопротекторів полівінілпіролідону (ПВП) та сахарози на морфофункціональний та ультраструктурний стан сперматозоїдів людини при патоспермії. У (22,3 ± 3,4), (26,8 ± 4,2), (18,6 ± 2,1)% сперміїв після вітрифікації з 0,25 М сахарозою; 10% ПВП та сумішшю 0,25 М сахарози, 10% ПВП, 10% сироваткового альбуміну людини відповідно, спостерігали виникнення вакуолей у хроматині ядер сперматозоїдів. Для свіжовиділених сперматозоїдів цей показник становив (16,6 ± 1,4)%. У досліджувальних групах ультраструктурні характеристики акросоми, аксонеми, периаксонемальних структур та джгутика сперматозоїдів суттєво не відрізнялися від контрольних зразків. Показано, що кріоконсервування сперматозоїдів людини методом вітрифікації з використанням розчинів сахарози та ПВП дозволяє зберегти їх життєздатність та ультраструктурну цілісність та є перспективним для використання у ДРТ. Ключові слова: сперматозоїди, кріоконсервування, вітрифікація, полівінілпіролідон, астенозооспермія. Реферат: Низкотемпературное консервирование сперматозоидов широко используется при лечении бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Методы криоконсервирования сперматозоидов из эякулятов при нормозооспермии являются рутинными, однако их невозможно использовать для сперматозоидов, полученных из эякулятов при патологиях сперматогенеза. Разработка методов криоконсервирования и оценка морфофункциональных и ультраструктурных характеристик сперматозоидов после криоконсервирования актуальны. В работе оценивали влияние криоконсервирования методом витрификации с использованием непроникающих криопротекторов поливинилпирролидона (ПВП) и сахарозы на морфофункциональное и ультраструктурное состояние сперматозоидов человека при патоспермии. В (22,3 ± 3,4), (26,8 ± 4,2), (18,6 ± 2,1)% спермиев после витрификации с 0,25 М сахарозой; 10% ПВП и смесью 0,25 М сахарозы, 10% ПВП, 10% сывороточного альбумина человека соответственно, наблюдали возникновение вакуолей в хроматине ядер сперматозоидов. Для свежевыделенных сперматозоидов этот показатель составлял (16,6 ± 1,4)%. В исследуемых группах ультраструктурные характеристики акросомы, аксонемы, периаксонемальних структур и жгутика сперматозоидов существенно не отличались от контрольных образцов. Показано, что криоконсервирование сперматозоидов человека методом витрификации с растворами сахарозы и ПВП позволяет сохранить их жизнеспособность и ультраструктурную целостность и перспективно для использования в ВРТ.

Here, we have presented the data describing the cryopreservation impact on DNA status of domestic and farm animal sperm, and outlined the main causes of DNA fragmentation and methods of its detection and DNA integrity preservation. The current methods to identify the DNA fragmentation rate have been shown to be quite efficient, but the choice for the optimal way is stipulated by animal species. The oxidative stress caused by an increased content of reactive oxygen species was recognized as the main mechanism in DNA cryodamage. To prevent this negative effect on germ genetic material, many protective media and rehabilitation solutions supplemented with antioxidants (non-enzymatic, enzymatic compounds and nanoparticles) have been developed. Thus, determining the sperm DNA fragmentation rate and maintaining its integrity are the necessary steps to improve the efficiency of domestic animal gamete cryopreservation as a part of reproductive technologies.