Gewinnung und Charakterisierung von Proteasen aus Thermoactinomyces vulgaris 111. Untersuchungen zur Proteasebildung in einer kleintechnischen Versuchsanlage A. LEUCHTENBERGER, P. KLINGENBERG und H. RUTTLOFF (EiiLyegnngen m i 10. 1. 1978) Unter Einsatz von The~~)ioacfi7iottiyces vulgnris nerden auf der Basis von irn Labor durchgefiihrten Voruntersuchnngen 'die Kult8urbedingangen ziir Gewinnung einer therrnostabilen Protease in 3 0 -1 -W d~~~o~-F e r m e n t o r e i i optirniert. hi Verhufe der Untersuchungen gelingt es, die prot,eolytische Akt'ivitat von ca. 115 TE/nil (56 "C) auf en. 850 TE/ml nach22 Std. Kulturdaner zu steigern. Die Reproduzierbarkeit der Enzyniaiisbeut,e sonie die statistische Absicherung der Ergebnisse liegen vor. Ausbeuteverluste durch Schaumaustritt RUS dem Fernientor konnen durch Einsatz von Ra,psoI als Entschanmer von ca. 157; auf 5% reduziert werden. Von besonderer Bedeutung ist dabei die Beobachtung, daB Rapsol eirie st'imulierende m'irkung auf die Proteasebildang ausiibt. 0,25% Raps61 ergeben cine Steigerung uni 150%. Da auch EssigsBure eine aktivitahfordernde Wirkung zeigt, n-ird angenommen, daO Fettsauren fur die Proteasebildung und -ausscheidoug durch T. 'wdyaris von besonderer Bedeut'nng sind.
Eine fortlaufende Selektion prot.eolyt,isch akt)iver Stainme von ThelNioactinonil/ces culgnris auf der Gruiidlage der nat'iirlichen biologischen VariabilitLt, verbunden mit einer Konservierung der Sporen an Luvos-Heilerde fuhrt zu st,abilen und leistungsgesteigerten Selekt.anten. Es gelingt, die Proteaseaktivit.at des Wildstanimes von clurchschnittlich 130 TE uin den Faktor 8 zu steigern. Fiir die Beimpfung von Schuttelund Submerskulturen ist ein Sporentiter von 10: je nil Niihrmedium ausreichend. Die konveiitionelle ;\;Iet,liode des Agitrdiffusionsplattentestes mit, Casein als Snbstrat ist fur die Vorauswnhl potentieller Prot'easebildner geeignet. AaOerdeni ist nach erfolgter Vorauswahl ein quantitativer Kachweis der in Snbmersknltur gebildeten Protesseakt,ivitat notmendig.
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