The membrane topology of the plasmid-encoded Pseudomonas aeruginosa ChrA protein, which effluxes chromate ions, was determined by the analysis of translational fusions with reporter enzymes alkaline phosphatase and beta-galactosidase. A novel 13-TMS (transmembrane segments) topology, with the N-terminus located in the cytoplasm and the C-terminus in the periplasmic space, was consistent with the enzyme activities determined in both Escherichia coli and P. aeruginosa. Alignment of the two halves of ChrA showed significant sequence homology, with TMS I, II, III, IV, V and VI displaying similarity to TMS VIII, IX, X, XI, XII and XIII, respectively, although with opposite membrane orientations. This suggests that ChrA arose from the duplication of a gene encoding a 6-TMS ancestral protein, followed by the insertion of extra TMS VII. These data also suggest that the two halves of ChrA may carry out distinct functions for the transport of chromate.
Plants and their microbiomes, including plant growth-promoting bacteria (PGPB), can work as a team to reduce the adverse effects of different types of stress, including drought, heat, cold, and heavy metals stresses, as well as salinity in soils. These abiotic stresses are reviewed here, with an emphasis on salinity and its negative consequences on crops, due to their wide presence in cultivable soils around the world. Likewise, the factors that stimulate the salinity of soils and their impact on microbial diversity and plant physiology were also analyzed. In addition, the saline soils that exist in Mexico were analyzed as a case study. We also made some proposals for a more extensive use of bacterial bioinoculants in agriculture, particularly in developing countries. Finally, PGPB are highly relevant and extremely helpful in counteracting the toxic effects of soil salinity and improving crop growth and production; therefore, their use should be intensively promoted.
The Bacillus subtilis strain 168 genome contains the chr3N-chr3C genes encoding the Chr3N/Chr3C protein pair of the chromate ion transporter (CHR) superfamily. Chr3N/Chr3C confers chromate resistance in Escherichia coli only when both proteins are expressed. Upstream of chr3N is the chrS gene encoding ChrS, a protein with homology to the Lrp/AsnC family of transcriptional regulators. When the chrS-chr3N-chr3C gene cluster was transferred to E. coli, a diminished level of chromate resistance was observed, as compared with E. coli transformants bearing only the chromate resistance genes, which displayed full resistance. These data suggested that the chrS gene product acts as negative regulator. RT-PCR assays demonstrated that expression of chrS diminishes transcription of the chromate resistance genes in E. coli, and that this repression was overcome by chromate. Electrophoretic mobility shift assays showed that purified ChrS protein specifically binds to the 5' region of chrS. These results indicate that the chr gene cluster forms an operon regulated negatively by ChrS binding to its own gene's regulatory region, and positively by chromate ions. Sequence analysis revealed similar operons in many Bacillales strains, suggesting some adaptive advantage. This is the first example of a bacterial heavy-metal resistance system controlled by an Lrp-type transcriptional regulator.
La fresa (Fragaria x ananassa) es un alimento exquisito, que proporciona beneficios a la salud, por lo que es la frutilla de mayor producción y exportación en México. Sin embargo, es altamente perecedera, susceptible de sufrir daños en poscosecha, por Botrytis cinerea y Rhizopus stolonifer, entre otros. El uso de plaguicidas en precosecha es la estrategia de control de estos patógenos; no obstante, está documentado que los plaguicidas dañan la salud humana y al ecosistema, lo que muestra la necesidad de estudiar alternativas amigables. El quitosano grado reactivo (QGR) es un polímero inocuo con actividad antifúngica ampliamente reportada, mientras que el octanoato de sodio (8:0) (OS) también tiene esta propiedad; sin embargo, hasta el momento se desconoce si el quitosano grado comercial (QGC) disponible en México, tiene el mismo efecto. Por lo tanto, el objetivo de esta investigación fue evaluar la efectividad de QGR y el compósito QGR-OS en la protección de fresa en poscosecha y compararla con la de QGC y el compósito QGC-OS. Los compuestos se asperjaron sobre los frutos y se incubaron simulando las condiciones de exportación. Los resultados mostraron reducción significativa de la severidad y la incidencia de las enfermedades fúngicas de fresa en poscosecha luego de la aplicación de QGR, QGC y QGR-OS, QGC-OS, no así del OS aplicado solo. El QGC y el compósito QGC-OS son excelentes candidatos para ser utilizados en un estudio comercial de mayor alcance.
Escherichia coli es una de las bacterias ambientales que frecuentemente se ha visto implicada en infecciones de la glándula mamaria bovina. Aunque se desconocen los factores de virulencia específicos involucrados en dicho proceso, se ha observado que las bacterias formadoras de biopelículas se asocian con infecciones persistentes. De igual forma se ha planteado que las bacterias móviles pueden ser más patógenas. El propósito del presente trabajo fue analizar la relación genética, capacidad de formación de biopelículas y movilidad de E. coli aislada de casos de mastitis bovina, así como la virulencia in vivo de aislados representativos. De acuerdo a los datos obtenidos en este trabajo el 67.7% de las bacterias pertenece al grupo filogenético A, el 17.6% al grupo B1 y el 14.7% al D. El estudio de la relación genética mediante (GTG)5 reveló que solo dos bacterias son idénticas genéticamente, el resto de las bacterias se organizaron en siete grupos distintos con 70% de similitud. Por otro lado, el 76.5% de las bacterias estudiadas fue capaz de formar biopelículas de forma fuerte, moderada o débil. Además, los genes csgA y fimA se detectaron en el 52.9% de las bacterias formadoras de biopelículas. Por su parte, el análisis de movilidad arrojó que el 70.6% fue móvil. Mientras que, el análisis de patogenicidad en larvas de Galleria mellonella reveló que aquellas bacterias formadoras de películas y móviles fueron capaces de matar un mayor número de larvas a las 24 h que las no formadoras. Los datos presentados en este trabajo indican que las E. coli causantes de mastitis bovina son muy diversas y pertenecen principalmente al grupo filogenético A y que las formadoras de biopelículas y móviles son más patógenas.
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