RESUMENOBJETIVO: Estandarizar la técnica ELISA para el diagnóstico de infección humana por Toxocara canis con antígeno excretado-secretado preparado en nuestro medio. MATERIAL Y MÉTODOS: Se colectó huevos de T. canis y se les incubó con formol (2%) a 28 o C hasta obtener larvas de tercer estadio, las que luego de ser liberadas fueron incubadas en RPMI a 37°C por 7 días; se reemplazó el medio por otro similar y almacenó a -20°C. Se concentró el antígeno y se dosó proteínas. Para la técnica de ELISA se utilizó sueros de pacientes con toxocariasis y de niños recién nacidos, como controles positivos y negativos, respectivamente, diluidos desde ¼ hasta 1/1024. Se sensibilizó placas de poliestireno con varias concentraciones de antígeno, utilizándose conjugado de peroxidasa e IgG de carnero anti IgG humana y sustrato OPD. Se realizó lectura de absorbancia a 492 nm con espectrofotómetro (Multiskan plus labsystems), siendo el punto de corte el promedio aritmético de la absorbancia de los sueros negativos más 3 desviaciones estándar. RESULTADOS: La concentración óptima del antígeno fue 50 ug/mL, la dilución del suero 1/128, la dilución del conjugado 1/1000 con densidad óptica mayor a 0,241. CONCLUSIONES: La técnica de ELISA para diagnóstico serológico de infección humana por Toxocara canis podría ser utilizada en estudios epidemiológicos en nuestro país. Queda pendiente la evaluación de su eficacia en futuros estudios. Palabras clave: Toxocara canis; toxocariasis; serología; ELISA. ELISA TECHNIQUE STANDARDISATION FOR HUMAN TOXOCARIASIS DIAGNOSIS SUMMARYOBJECTIVE: To standardise ELISA technique for Toxocara canis human infection diagnosis by using excreted-secreted antigen prepared in our country. MATERIAL AND METHODS: T. canis eggs were collected by incubation with formalin (2%) at 28 o C in order to obtain third stage larvae that were freed and incubated in RPMI at 37°C for 7 days; the medium was replaced by a similar one and stored at -20°C. Antigen was concentrated and protein dosage was made. Sera from patients with toxocariasis and newborns were used as positive and negative controls by ELISA technique, dilutions ¼ to 1/1024. Polystyrene plates were sensitised with antigen in several concentrations and conjugated peroxidase with horseradish IgG, anti human IgG and substrate OPD were used. Absorbance was read with spectrophotometer (Multiskan plus labsystems) at 492 nm. Cut off point was determined by negative sera absorbencies arithmetic mean plus 3 standard deviations. RESULTS: Antigen concentration was 50 ug/mL, sera dilution 1/128, conjugate dilution 1/1000 with optical density above 0,241. CONCLUSIONS: ELISA technique for serologic diagnosis of human infection by Toxocara canis could be used in epidemiological studies in our country. Its efficacy will be determined in future studies.
En el presente trabajo reportamos especies de ácaros Astigmata y Prostigmata que producen patología humana en el Perú. El estudio se hizo en pacientes que acudieron al Instituto de Medicina Tropical «Daniel A. Carrión» Huinco y en polvo doméstico de Lima, Lambayeque, Trujillo y Ucayali; se consideraron además referencias bibliográficas publicadas al respecto. Hallamos los siguientes Astigmata: Tyrophagus putrescentiae, Acarus siro, Suidasia sp., Dermatophagoides pteromyssinus, Glycyphagus domesticus, y Sarcoptes scabiei; y los Prostigmata: Demodex brevis, Demodex follicalorum, Tarsonemus sp. y Trombicula irritans.
RESUMEN OBJETIVO: Realizar un metanálisis revisando bibliografía publicada en los últimos 20 años, que comparaba directa o indirectamente los métodos de diagnóstico serológico y parasitológico de infección por Strongyloides stercoralis. MATERIAL Y MÉTODOS: Se trató de construir una tabla tetracórica con la cual calcular los valores de sensibilidad y especificidad de la serología, teniendo a los métodos parasitológicos como prueba de oro. Finalmente se seleccionó aquellas referencias que comparaban la técnica de ELISA con los métodos parasitológicos, buscando información que permitiera calcular los valores predictivos positivo y negativo. RESULTADOS: Aplicando criterios de selección, fueron elegidas 25 referencias. Los valores predictivos positivo y negativo resultaron 85,33% y 97,83%, respectivamente. CONCLUSIÓN: Estos resultados muestran la utilidad potencial del método de ELISA para el diagnóstico de tamizaje de estrongiloidiosis, para facilitar estudios en poblaciones que se encuentren expuestas a esta parasitosis potencialmente letal.Palabras clave: Strongyloides stercoralis; estrongiloidiasis; ELISA; diagnóstico; serología. USEFULNESS OF PARASITOLOGIC AND SEROLOGIC STUDIES IN THE DIAGNO-SIS OF HUMAN STRONGYLOIDIASIS. METAANALYSIS EXERCISE ABSTRACTOBJECTIVE: To conduct metaanalysis by reviewing bibliographic references published during the last 20 years that directly or indirectly compared serologic and parasitologic diagnostic methods for Strongyloides stercoralis infection. MATERIAL AND METHODS: We tried to build a tetracoric table to obtain values of serology sensitivity and specificity, choosing parasitologic methods as gold standard. Finally, those references that compared ELISA with parasitologic methods were selected and information was obtained to calculate positive and negative predictive values. RESULTS: Twenty-five references were chosen by applying selection criteria. Positive and negative predictive values were 85,33% and 97,83%, respectively. CONCLUSION: These results show the potential usefulness of ELISA method as a screening test for strongyloidiasis, in order to facilitate studies in populations exposed to this potentially lethal parasite.
Objetivo: Determinar la presencia de parásitos del género Acanthamoeba en sujetos asintomáticos. Lugar: Servicio de Oftalmología del Hospital Nacional Cayetano Heredia. Material y métodos: Se examinó mediante hisopado corneal a 100 individuos sin evidencia de lesión en la cornea durante los meses de abril y mayo de 1999. Las muestras fueron sembradas en agar napolitano y en agar no nutritivo al 2%, incubadas y observadas a los 7 días. Resultados: De las 100 muestras revisadas, en 16 se observó quistes de Acanthamoeba; 44 individuos fueron varones, no hubo diferencias significativas del diagnóstico entre los sexos; 63% de los individuos era menor de 20 años, con predominio de la infección en sujetos más jóvenes; 89% refirió haber visitado zonas donde hay reportes de la presencia del parásito (Piura, Ica), 58 sujetos manifestaron haber nadado en piscinas o ríos. De 76 sujetos que informaron sobre la fuente de provisión de agua para uso doméstico, 63% la obtuvo de camiones cisterna y 25% de pozos, pero la infección fue más frecuente en estos últimos (31,6% vs. 12,5%). El hallazgo de Acanthamoeba coincidió con ametropía (44%), conjuntivitis (16.4%) y blefaritis (12,3%). Conclusión: Se evidencia la presencia del parásito en individuos jóvenes sin lesión corneal quienes están en riesgo de sufrir queratitis.
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