У статті представлені результати розробки способу диференційної діагностики африканської та класичної чуми свиней методом дуплексної зворотно-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції (ЗТ-ПЛР) у режимі реального часу. У процесі роботи підібрано три пари специфічних олігонуклеотидних праймерів до цільових ділянок гену B646L вірусу АЧС, нетрансльованої ділянки 5' UTR вірусу КЧС та гену PRP(внутрішній контроль). Обрано оптимальний режим ампліфікації та визначено критерії оцінки результатів ПЛР. Розроблений діагностикум дозволяє одночасно виявляти обидва збудники (вірус АЧС та КЧС) у досліджуваній пробі, сприяючи цим економії часу, трудових ресурсів та коштів, які витрачаються на дослідження. Ключові слова: африканська чума свиней (АЧС), класична чума свиней (КЧС), ЗТ-ПЛР у режимі реального часу, праймери. * Аспірант, наук. керівник -д-р вет. наук, проф., член-кор. Ничик С.А.
The purpose. To study epizootic situation concerning classical swine fever (CSF) in the world in 2012-2017 and to determine major factors which can promote spread of infection to Ukraine. Methods. Data of official veterinary statistics, materials of scientific publications and Internet-resource WOAH (http://www.oie.int) are used. Reports from 243 countries of the world including Europe (55), Asia (46), Africa (59), America (52) and Oceania (31) are analyzed. Results. It is established that for the last 6 years CSF flashes were registered in 30 countries (12,3%) of 243 analyzed; in 92 countries (37,9%) there were no revealed flashes of disease for the accounting period; 57 countries (23,5%) did not give information on CSF; and in 64 countries (26,3%) CSF had never registered.
Izucheniye vliyaniya insulina na pogloshcheniye energeticheskikh substratov miokardom pri sakharnom diabete [Study of the effect of insulin on the intake of energy substrates myocardium in diabetes]. Extended abstract of candidate's thesis. Kyiv [in Russian].
Інститут ветеринарної медицини НААН КОНСТРУЮВАННЯ ТА АПРОБАЦІЯ ПРАЙМЕРІВ ДЛЯ ДЕТЕКЦІЇ ВІРУСУ НОДУЛЯРНОГО ДЕРМАТИТУ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ МЕТОДОМ ПЛР У РЕАЛЬНОМУ ЧАСІ Здійснено конструювання праймерів та флуоресцентного зонду для детекції вірусу нодулярного дерматиту методом полімеразної ланцюгової реакції у реальному часі (ПЛР-РЧ). Запропоновані праймери дають можливість детектувати всіх представників роду Capripoxvirus. Проведено порівняльні дослідження комерційної ПЛР-суміші qScript™ XLT (Quanta) та самостійно приготовленої ПЛР-суміші, в результаті чого отримані однакові результати параметрів ампліфікації, що дозволяє зменшити собівартість дослідження. Проведена апробація запропонованих праймерів на 32 зразках ДНК, отриманих за експериментального зараження великої рогатої худоби вірусом Lumpy skin disease virus та вірусом віспи кіз. Ключові слова: нодулярний дерматит, ВРХ, ПЛР-РЧ, праймери. DEVELOPMENT AND APPROBATION OF PRIMERS FOR IDENTIFICATION OF LUMPY SKIN DESEASE VIRUS BY qPCR METHODIntroduction. Lumpy Skin Disease (LSD) is a highly contagious transboundary viral disease of cattle characterized by the formation of necrotizing skin nodules. The OIE requires notification of this disease due to significant economic losses during the outbreak. As the numbers of LSD outbreaks are increasing in the world, including Russia that shares borders with Ukraine, a threat of pathogen introduction into the country is high.The goal of the work was to design primers and a fluorescence probe for LSD virus detection and their approbation with qPCR method.Materials and methods. The specific primers and a fluorescence probe to the part of the viral genome which encoding the core DNA binding phosphoprotein (GenBank: KH 764645) were selected. The developed primers provided amplification of the viral genome fragment with length 151 bp. The Capripoxvirus DNA samples, provided by Dr. Hoffman (FLI, Germany) were used for approbation of developed primers. Both in-house PCR-mix (Thermo Fisher Scientific reagents) and commercial qScript™ XLT (Quanta) were used. Amplification was conducted using Roto-Gene Q.Results of research and discussion. It was confirmed that all Capripoxvirus agents could be detected using the developed primers. The study shown that the results obtained using the in-house PCR-mix were similar to the commercial qScript™ XLT (Quanta). Using the in-house PCR-mix potentially can reduce the test's cost. It was confirmed 100% specificity and high sensitivity of the developed primers on 18 LSD virus and 14 goat poxvirus DNA samples obtained from experimentally infected cows and goats.Conclusions and prospects for further research. The developed primers can be recommended to use in the veterinary medicine labs for diagnosis of both LSD virus and other Capripoxvirus after the appropriate validation will be done.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
customersupport@researchsolutions.com
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
This site is protected by reCAPTCHA and the Google Privacy Policy and Terms of Service apply.
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.