Resumen76 cepas de las familias Enterobacteriaceae y Pseudomonadaceae fueron conservadas por el método semistock en papel filtro y 68 de las mismas por el método stock de criopreservación, en el banco de cepas y genes del Instituto de Biotecnología de la Universidad Nacional de Colombia (IBUN). La eficacia de los métodos de preservación se realizó mediante la evaluación de la viabilidad a las 24 horas de conservación y fue calculado el porcentaje de recuperación. En conclusión, la preservación en papel filtro y criopreservación son adecuados métodos semistock y stock, respectivamente; ya que el 73.7% de los microorganismos de la familia Enterobacteriaceae y el 82.3% de los microorganismos de la familia Pseudomonadaceae, presentaron un porcentaje de recuperación mayor al 50%. Por otra parte, se implementó una base de datos elaborada en el software Access ®, la cual se implemento con éxito en el IBUN y en la página Web de la Universidad Nacional de Colombia en la dirección electrónica www.ibun.unal.edu.co/instituto/cepario, que esta disponible al público en general.Palabras claves: criopreservación, viabilidad, cultivo semistock, cultivo stock, base de datos. Abstract76 strains of the family Enterobacteriaceae and Pseudomonadaceae were conserved by filter paper semistock method and 68 strains by Cryopreservation stock method in the bank of strains and genes of Biotechnology Institute of the Universidad Nacional de Colombia (IBUN). The effectiveness of methods was tested for the viability at 24 hours after preservation and was calculated the recovery percentage. Thus in conclusion, the preservation in paper filter and cryopreservation are suitable semistock and Stock methods, respectively; because 73.7% of family Enterobacteriaceae microorganisms and 82.3% of family Pseudomonadaceae microorganisms, presented a high recovery percentage greater 50%. In addition, was implemented a strain bank data base made in software Access ®, in Biotechnology Institute and Universidad Nacional de Colombia Web page www.ibun.unal.edu.co/instituto/cepario. It is available for general public.