Summary Cross‐neutralization tests with rabbit antisera I‐1 (I serotype), P‐1 (II serotype) and T80 (II serotype) were carried out with 14 porcine enteroviruses isolated in Bulgaria and 10 viruses received from other countries. On the basis of these investigations 10 of the 14 viruses isolated in Bulgaria were shown to be related to the Teschen‐Talfan group. One virus (P‐1) isolated in Bulgaria gave reciprocal cross‐reaction with T80, T52A, S‐180/4 (II serotype). Three viruses (K‐1, P‐2, Si‐1) gave unilateral neutralization test with virus P‐1 (II serotype). Out of 10 viruses received from abroad one (L‐1) was neutralized with antisera I‐1 (I serotype) and P‐1 (II serotype); 5 strains (S‐180/4, S‐159, T‐1, U‐6, L‐1) supplied from abroad were neutralized with 3 antisera (I‐1, P‐1, L‐1). On the basis of these experiments, the author suggests that the classification should include intermediate serological types of the swine enteroviruses giving cross‐reactions with more than one serotype. Zusammenfassung Serologische Klassifizierung von Schweine‐Enterovirusstämmen aus Bulgarien und anderen Ländern Zwischen 14 Schweine‐Enterovirusstämmen, die in Bulgarien isoliert worden waren, sowie 10 anderen aus dem Ausland herrührenden Stämmen und den Kaninchenantiseren I‐1 (Serotyp I), P‐1 (Serotyp II) und T80 (Serotyp II) wurden kreuzweise Neutralisationsteste ausgeführt. Auf der Grundlage dieser Untersuchungen zeigte sich bei 10 der in Bulgarien isolierten 14 Virusstämme eine Verwandtschaft zu der Teschen‐Talfan‐Gruppe. Ein Virusstamm, der gleichfalls in Bulgarien isoliert worden war, lieferte reziproke Kreuzreaktionen mit T80, T52A, S‐180/4 (Serotyp II). Drei Stämme (K‐1, P‐2, Si‐1) ergaben eine einseitige Neutralisation mit Virus P‐1 (Serotyp II). Von den 10 von außerhalb stammenden Virusstämmen wurde einer (L‐1) durch die Antiseren I‐1 (Serotyp I) und P‐1 (Serotyp II) und 5 andere (S‐180/4, S‐159, T‐1, U‐6, L‐1) durch 3 Antiseren (I‐1, P‐1, L‐1) neutralisiert. Auf Grund der Versuche schlägt der Autor vor, daß eine Klassifizierung auch diejenigen serologischen Intermediärtypen der Schweine‐Enteroviren einbeziehen sollte, die mit mehr als einem Serotyp Kreuzreaktionen aufweisen. Résumé La classification sérologique des souches porcines d'entérovirus en Bulgarie et dans d'autres pays On effectua des tests de neutralisation croisée sur 14 souches porcines d'entérovirus isolées en Bulgarie ainsi que sur 10 autres souches de provenance étrangère avec les antisérums de lapin I‐1 (sérotype I), P‐1 (sérotype II) et T80 (sérotype II). Ces recherches permirent de constater chez 10 des 14 souches isolées en Bulgarie une parenté avec le groupe Teschen‐Talfan. Une souche de virus également isolée en Bulgarie montra des réactions réciproques croisées avec T80, T52A, S‐180/4 (sérotype II). Trois souches (K‐1, P‐2, Si‐1) donnèrent une neutralisation unilatérale avec le virus P‐1 (sérotype II). Sur les 10 souches de virus de provenance extérieure, l'une (L‐1) fut neutralisée par les antisérums I‐1 (sérotype I) et P‐1 (sérotype II) et 5 autre...

Summary Two porcine enteroviruses isolated in Bulgaria were used for experimental infection of pigs that had sucked colostrum: most of these pigs had no antibodies prior to infection in the laboratory. All animals that survived showed high levels of antibody. All 15‐days old pigs showed diarrhoea between the 3rd and 4th to 6th days after inoculation with these two enteroviruses. At the beginning there were soft faeces and then a profuse diarrhoea for 2 or 3 and sometimes 5 days. Slight diarrhoea appeared in 25‐day old pigs 5–7 days after inoculation and lasted 1–3 days. The small intestine, colon and cecum in the pigs killed when they had diarrhoea contained very diluted contents. There was serous desquamative enteritis and oedema of the propria mucosa, especially of its connective tissue, with marked damage of the epithelial layer. The liver cells were finely vacuolated and, in some cases, the nuclei were lysed. The liver endothelial cells were slightly activated. In the cerebral hemispheres there was slight multiplication of glial cells in the areas of small and middle pyramidal cells, around which there were slight edema and neuronophagia. The glial proliferation was more marked in pigs with clinical encephalitis and with dystrophic areas and neuronophagia. Zusammenfassung Infektionsversuche mit Schweine‐Enteroviren bei Schweinen Schweine, die Kolostrum aufgenommen hatten, wurden experimentell mit zwei Schweine‐Enterovirus‐Stämmen infiziert, die in Bulgarien isoliert worden waren. Vor dem Infektionsversuch besaßen die meisten dieser Schweine keine Antikörper. Wenn die Tiere überlebten, hatten sie hohe Antikörpertiter gebildet. Alle Schweine mit einem Alter von 15 Tagen hatten zwischen dem 3. und 4. bis 6. Tag nach der Inokulation mit den beiden Stämmen Durchfall. Zunächst wurde der Kot weich, und dann setzte für 2 oder 3, manchmal auch 5 Tage ein profuser Durchfall ein. Bei Schweinen, die 25 Tage alt waren, machte sich nur leichter Durchfall bemerkbar, der 5 bis 7 Tage nach der Inokulation begann und 1 bis 3 Tage dauerte. Bei getöteten Schweinen, die an Durchfall erkrankt waren, war der Inhalt von Dünndarm, Blinddarm und Dickdarm stark verdünnt. Dabei fanden sich eine schwere desquamative Enteritis und besonders im Bindegewebe der Propria mucosae ein Ödem sowie eine starke Schädigung des Epithelbelages. Die Leberzellen zeigten feine Vakuolen und in manchen Fällen Karyolyse. Die Leber‐Endothelien waren etwas aktiviert. In den Großhirnhemisphären fand sich in der Zone der kleinen und mittleren Pyramidenzellen eine geringfügige Vermehrung der Gliazellen, um die herum ein mäßiges Ödem und Erscheinungen der Neuronophagie festgestellt wurden. Bei Schweinen, die klinisch Enzephalitis sowie dystrophische Zonen und Neuronophagie zeigten, war die Glia‐Proliferation stärker ausgeprägt. Résumé Expériences de transmission de souches d'entérovirus porcins chez des porcs On infecta expérimentalement des porcs ayant bu du colostrum au moyen de deux souches d'éntérovirus porcin isolées en Bulgarie. Avant l'essai d'infection ce...

Zusammenfassung Es wurde die direkte Modifikation der Immunofluoreszenz‐Methode von Coons und Mitarbeiter zur Beobachtung der Lokalisierung und Vermehrung eines ECBO‐Virusstammes (Z‐62) in Kälbernierenzellen benutzt. Das früheste Auftreten des Antigens wurde in der 5. Stunde nach der Beimpfung der Gewebekulturen festgestellt. Das Virusantigen häufte sich meistens um den Kern im Cytoplasma an und ähnelte dem Kernhalo. Bei einigen betroffenen Zellen wurde auch in den Nachbargebieten des Cytoplasmas Antigen gefunden. In späteren Stunden nach der Beimpfung wurde ein Fortschreiten der Infektion beobachtet, das in vielen fluoreszierenden Herden des betroffenen Gewebes zutage trat. Während dieser Phasen der Infektionsentwicklung war ein Fluoreszieren des ganzen Cytoplasmas festzustellen. Die Kerne waren gewöhnlich deformiert und in die Peripherie der infizierten Zelle gedrängt. Die angewandte Methode eignet sich zur Beobachtung der Lage und Anhäufung des ECBO‐Virusantigens von Z‐62 in den infizierten Gewebekulturen. Summary Studies on the localisation of an ECBO virus in calf kidney cells with the help of a fluorescent antibody The direct modification of the immunofluorescent method of Coons et al. for observing the localisation and multiplication of an ECBO virus strain Z‐62 was studied in calf kidney cells. Antigen first appeared five hours after inoculation of the tissue cultures and proliferated mainly in the cytoplasm around the nucleus, forming a halo‐like structure. In a few affected cells antigen was also present in adjacent areas of cytoplasm. Later the infection extended so that many fluorescing foci were seen in the affected tissue and the whole cytoplasm became fluorescent. The nuclei were usually deformed and pushed to the edge of the infected cells. The method is suitable for observing the site and accumulation of ECBO virus antigens of strain Z‐62 in infected tissue cultures. Résumé Recherches sur la localisation du virus ECBO dans les cellules de rein de veau à l'aide d'anticorps fluorescents Pour suivre la localisation et la multiplication d'une souche de virus ECBO (Z‐62) dans des cellules de rein de veau, nous avons utilisé la modification directe de la méthode par immunofluorescence de Coons et coll. La première apparition de l'antigène s'observe 5 heures après l'inoculation de la culture de tissu. L'antigène viral s'accumule en général dans le cytoplasme près du noyau et ressemble alors au halo nucléaire. On observe l'antigène plus rarement dans le cytoplasme avoisinant. Plusieurs heures après l'inoculation, la progression de l'infection se manifeste par de nombreux foyers fluorescents dans le tissu atteint. Au cours d'une phase du développement, le cytoplasme apparaît fluorescent dans sa totalité. Les noyaux subissent des déformations et sont repoussés à la périphérie de la celulle infectée. La méthode utilisée se révèle appropriée pour observer la position et l'accumulation de l'antigène viral ECBO Z‐62 dans des cultures de tissu infectées. Resumen Estudios sobre la localización de un virus ECBO e...

Summary Primary tissue cultures were prepared from kidneys of 52 clinically healthy sucking pigs. The kidney tissues yielded trypsinized cells with preserved dividing ability and metabolism. As a result of their multiplication, a confluent cell sheet was formed on the glass surface in the course of 72 to 96 hours incubation at 37° C. After this period eleven of them showed spontaneous cytopathogenic changes and viruses were isolated which were resistant to ethyl ether, chloroform, trypsin, sodium desoxycholate and saponin. Ten of the 11 viruses were tested and were neutralized with hyperimmune rabbit sera obtained against standard porcine enteroviruses. In the blood of the pig virus carriers a high level titer of neutralization antibodies against homologous enteroviruses was established. The results of these investigations suggest that a latent enterovirus infection of the pig kidney cells was present in vivo. The role is discussed of an “antibody‐enterovirus” complex as a form of existence of the virus particles in the cell‐virus system, its disintegration in the nutrient tissue culture medium and the subsequent release of unmasked, virulent enterovirus particles, able to infect susceptible cells of the tissue cultures. Zusammenfassung Latente ECSO‐Virus‐Infektionen bei Saugferkeln I. Isolierung latenter Enteroviren aus Nierengewebekulturen von gesunderscheinenden Saugferkeln Aus den Nieren von 52 klinisch gesunden Saugferkeln wurden Gewebe‐Primärkulturen hergestellt. Aus dem Nierengewebe wurden trypsinierte Zellen gewonnen, bei denen Teilungsfähigkeit und Stoffwechsel erhalten waren. Nach 72‐ bis 96stündiger Bebrütung bei 37° C bildete sich auf der Glasoberfläche ein konfluierender Zellbelag aus. Danach entwickelten sich in 11 Kulturen spontan zytopathogene Veränderungen, und es wurden Viren isoliert, die gegenüber Äthyläther, Chloroform, Trypsin, Na‐desoxycholat und Sapronin resistent waren. Von ihnen wurden 10 getestet und mit einem Kaninchen‐Hyperimmunserum gegen Standard‐Enteroviren vom Schwein neutralisiert. Im Blut der Virusträger fand sich ein hoher Titer neutralisierender Antikörper gegen die homologen Enteroviren. Diese Befunde machen eine in vivo bestehende Enterovirus‐Infektion der Schweinenierenzellen wahrscheinlich. Die Bedeutung eines “Antikörper‐Enterovirus”‐Komplexes als einer Existenzform von Viruspartikeln im Zell‐Virus‐System wird diskutiert im Hinblick auf den Zerfall im Gewebekultur‐Nährmedium und die folgende Freisetzung unmaskierter virulenter Enteroviruspartikel, die fähig sind, empfängliche Zellen der Gewebekultur zu infizieren. Résumé Infections latentes à ECSO‐virus chez les porcelets I. Isolement d'entérovirus latents sur culture de tissu de reins de porcelets apparentent sains Nous avons préparé des cultures de tissue primaires à partir des reins de 52 porcelets cliniquement sains. De ce tissu rénal, nous avons obtenu des cellules trypsinisées, dont la faculté de division et le métabolisme étaient préservés. Une couche cellulaire confluante se forme sur la surface du verre après 72 ...