Latar Belakang: Rhodamin B merupakan zat warna sintesis yang umumnya digunakan sebagai zat warna kertas, tekstil atau tinta yang menyebabkan iritasi pada saluran pernapasan dan bila digunakan dapat menyebabkan terjadinya kanker dan kerusakan hati dalam tubuh. Penggunaan Rhodamin B pada waktu yang lama akan terjadi bahaya akut jika tertelan dan mengakibatkan muntah yang menimbulkan iritasi pada saluran pencernaan dan menimbulkan gejala keracunan. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya lipstick yang mengandung Rhodamin B. Metode: Metode penelitian yang dilakukan pada penelitian kualitatif dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan penelitian kuantitatif dengan Spektrofotometri UV-VIS. Hasil: Sampel lipstik terbukti secara kualitatif mengandung rhodamin B dengan fase gerak dan fase diam etanol 70%: ammonia: etil asetat (5:2,5:12,5) dan silika gel 254 nm. Dengan nilai RF sebesar 0,57 Pada penelitian kuantitatif, kadar rhodamin B ditemukan berjumlah 2,598 mg/L. Kesimpulan: Dibuat lipstick yang beredar di kecamatan Banjarmasin Utara terbukti mengandung rhodamin B.