Setiap perusahaan umumnya memiliki sistem distribusi dan transportasi dalam menunjang pengiriman barang kepada customer. Diperlukan sistem distribusi yang efektif dan efisien sehingga biaya dari transportasi dalam perusahaan dapat diminimasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan algoritma Ant Colony System (ACS) untuk model matematis Heterogeneous VehicleRouting Problem with Soft Time Window (HVRPSTW) pada penentuan rute transportasi yang dapat meminimasi biaya pada perusahaan PT XYZ. HVRPSTW merupakan VRP yang mempertimbangkan kendaraan yang beragam dan jendela waktu dengan adanya biaya penalti yang dibebankan apabila kendaraan tiba di luar waktu yang telah ditentukan. Salah satu cara yang digunakan untuk menyelesaikan permasalahan VRP adalah metode metaheuristic ACS. Metode ACS diimplementasikan untuk menemukan rute kendaraan terbaik sesuai dengan kendala-kendala yang sudah ditentukan. Tahapan awal adalah mencari solusi awal menggunakan metode Nearest Neighbour yang akan digunakan sebagai pheromone awal. Proses pencarian rute pada ACS menggunakan tahapan tour construction lalu dilakukan update pheromone. Pemecahan masalah akan dilakukan dengan bantuan aplikasi Python. Hasil dari penelitian menunjukkan bahwa dihasilkan total jarak sebesar 1448,98 km dan total cost sebesar Rp. 3.582.367,86, di mana terjadi selisih jarak dengan penelitian sebelumnya menggunakan metode eksak sebesar 6,48 km (0,45%) dan selisih total biaya sebesar Rp. 42.248,86 (1,19%). Kata kunci: ant colony optimization, vehicle routing problem, kapasitas kendaraan yang beragam, jendela waktu, biaya transportasi.