Free extracellular heme has been shown to activate several compartments of innate immunity, acting as a danger-associated molecular pattern (DAMP) in hemolytic diseases. Although localized endothelial barrier (EB) disruption is an important part of inflammation that allows circulating leukocytes to reach inflamed tissues, non-localized/deregulated disruption of the EB can lead to widespread microvascular hyperpermeability and secondary tissue damage. In mouse models of sickle cell disease (SCD), EB disruption has been associated with the development of a form of acute lung injury that closely resembles acute chest syndrome (ACS), and that can be elicited by acute heme infusion. Here we explored the effect of heme on EB integrity using human endothelial cell monolayers, in experimental conditions that include elements that more closely resemble in vivo conditions. EB integrity was assessed by electric cell-substrate impedance sensing in the presence of varying concentrations of heme and sera from SCD patients or healthy volunteers. Heme caused a dose-dependent decrease of the electrical resistance of cell monolayers, consistent with EB disruption, which was confirmed by staining of junction protein VE-cadherin. In addition, sera from SCD patients, but not from healthy volunteers, were also capable to induce EB disruption. Interestingly, these effects were not associated with total heme levels in serum. However, when heme was added to sera from SCD patients, but not from healthy volunteers, EB disruption could be elicited, and this effect was associated with hemopexin serum levels. Together our in vitro studies provide additional support to the concept of heme as a DAMP in hemolytic conditions.

A formação do caráter de uma pessoa nasce das relações familiares na infância, cabendo aos pais a difícil missão de ensinar a sermos pessoas felizes e úteis; tanto para si mesmo, quanto para os outros. Aos meus pais, agradeço de coração, por terem me direcionado para um futuro feliz, digno e promissor.O conhecimento vem do fruto do compartilhamento, e importantes pessoas aceitam a missão de auxiliar frente a este caminho. Meu segundo agradecimento é aos meus professores que contribuíram para minha formação acadêmica, em especial, a minha orientadora, Patricia, que não mediu esforços para tornar está dissertação uma realidade.Agradeço a todas as empresas que participaram, abrindo as portas para trabalhar sobre o tema proposto, sugerindo ações e contribuições agregadoras.Por fim, deixo a minha gratidão profunda a equipe mais importante da minha vida, segue o meu agradecimento especial para minha esposa Mayra e meus dois filhos, Breno e Dante, que juntos, me deram a força necessária para lutar e sublimar todas as provas apresentadas. Amo vocês mais que minha vida. RESUMOA pré-fabricação de elementos de concreto ganhou destaque dentro da construção civil brasileira nos últimos anos. Devido a produção industrializada, este seguimento vem propiciando um produto com melhor controle de qualidade e desempenho tecnológico. Entretanto, o setor ainda se caracteriza pela grande variação de demanda, que é reflexo do mercado com suas diferenças de tipologias (peças) solicitadas em obra. A baixa padronização dos projetos, fluxos e das cargas de trabalhos, dificulta uma estabilidade produtiva ao longo do mês. Com o intuito de melhorar a produção de elementos pré-fabricados e minimizar as variações na qualidade do produto final, a presente pesquisa teve como objetivo utilizar técnicas Lean, especificamente ciclos de melhorias contínuas, para a estabilização da produção. Estes ciclos são capazes de auxiliar no desenvolvimento de soluções em situações dinâmicas e incertas da produção. O método de pesquisa aplicado foi a Pesquisa-Ação (PA), que permitiu ao pesquisador (também coordenador da produção da empresa) interferir diretamente na linha produtiva, com a devida abordagem científica. Inicialmente, optou-se pelo estudo da linha de produção de vigas protendidas, por ser o produto mais complexo (montagem) e de maior relevância para a fábrica. Aplicou-se questionários, em seguida, foram estudadas e mapeadas as atividades do processo produtivo. Na sequência, foram realizadas várias intervenções em ciclos de melhorias contínua para a melhoria dos processos, bem como, levantamento da duração das atividades e das características das peças produzidas nesta linha. A pesquisa resultou nas recomendações para estabilização desta linha de produção específica, sendo respaldada na aplicação destes ciclos de melhorias no processo produtivo de elementos pré-fabricados de concreto protendido. Identificouse um potencial de melhoria na estabilidade produtiva, resguardando o cuidado com a variação das tipológicas das peças de concreto protendidas pré-...