Inhalt: Durch zwei Versuche sollte geklart werden, wie gut die Ubereinstimmung bei der MilchprogesteronOestimmung mit den Meflverfahren R I A -Milchfettextraktion und EIADirekttest ist und welche Reproduzierbarkeiten beim E I A zu erreichen sind. Beim Vergleich der Oeiden Bestimmungsverfahren ~ die Proben wurden unabhangig voneinander in z w e i getrennten Labors analysiertergab sich eine Korrelation von r = 0.86 ( P < 0.01). Dcr Qualititstest eryah fur Proben mit sehr niedrigen Progesterongehalten lic2riationskoeffizieriten von intra-assay 2 7 % und inter-assay 53%. Bei mittleren Hormonkonzentratiunen betrugen die entsprcchenden. HVerte 10% und 1 9 % und bei hohen LVerten 1 0 % und 14%. Die ermittelten Ergebnisse stellen die Eignung des e n z y m i m m unologischen Dirckttests fiir die Progesteronbestimmung in der Milch z u m Zwecke der routinemifligen Fruclitbarkeitsuberwachung unter Beweis.Contents: Determination of progesterone in cow's milk; comparison of the RIA performed on fat extract with the EIA performed o n unextracted milk and assessment of the reliability of the EIA. T w o experiments were conducted to assess whether a n e n z y m e immunoassay ( E I A ) is suita6le t o measure the concentration of progesterone in cow's milk. In trial 1 progesterone was determined in whole milk with the E I A and in the f a t extract of the same samples with a radioimmunoassay (RIA). Agreement of the t w o assays was very good; the correlation coefficient was r = 0.86 (P < 0.01). In trial 2 the repeatability of the milk progesterone determiiiation w i t h the EIrl was assessed. Milk samples f r o m f i v e cows each at three levels of milk progesterone (low, medium, high) were used. Each sample was determined five times in duplicate on each of. five successive days. The mean intra-and inter-assay coefficients of variation at the low, medium and high progesterone Ievels were 2 7 % and 53%, 10% and 19%, 10% and 14%,clusion the e n z y m e immunoassay is suitable t o monitor ovarian f u n c t i o n in dairy cows b y way of milk progesterone determination. E inleitung Der Milchprogesterontest hat wegen seiner einfachen Handhabung eine zunehmende Bedeutung fiir das Fruchtbarkeitsmanagement von Milchkiihen erlangt. Seit kurzer Zeit steht neben dem bewahrten Radioimmuntest (RIA) auch der Enzymimmuntest (EIA) nach Arnstadt und Cleere (1981) zur Progesteronbestimmung zur Verfugung. In der U.S. Copyright Clearance Center Statement: 0044-5371/S5/2001-0034 $ 02.50/0 Progesteronbestimmung in Kuhmilch: Vergleich der Ergebnisse . . .
Inhalt Der Einfluβ zweier Haltungssysteme auf den puerperalen und nachpuerperalen Abschnitt wurde bei 72 Kühen (32 in der Anbindehaltung und 40 in der Laufstallhaltung) untersucht. Die rektale und vaginale Kontrolle erfolgte von der Geburt an in fünf‐ bis siebentägigen Abständen, die Milchprobenentnahme für die Progesteronbestimmung in dreitägigen Intervallen bis zum 72. Tag p.p. Für die Progesteronbestimmung im Milchfett wurde der Enzymimmuntest eingesetzt, für den sich in Vorversuchen bei Parallelmessungen von 360 Proben mit dem Radioimmuntest ein Korrelationskoeffizient von r = 0,973 ermitteln lieβ. Kühe in Boxenlaufstallhaltung wiesen insgesamt ein geringeres Internall zwischen Geburt und abgeschlossener Uterusinvolution auf als Tiere in der Anbindehaltung (22,5 ± 4,1 gegenüber 27,3 ± 6,1 Tage: p ≤ 0,05). Die gleiche Tendenz war auch dann gegeben, wenn Komplikationen intra partum oder in der Nachgeburtsperiode aufgetreten waren (Uterusinvolutionsdauer 24,8 ± 6,1 gegenüber 31,6 ± 3,6 Tage). Die Uterusinvolution primiparer Tiere verlief schneller als die der sekundo‐ oder pluriparen (22,6 ± 3,0; 24,8 ± 7,8; 2 7,1 ± 5,6 Tage). Im Hinblick auf den Wiederbeginn der Ovarfunktion waren unabhängig von der Haltungsart vier Grundtypen anhand des Verlaufs der Progesteronkurve zu differenzieren: 1. relativ früher Beginn der Ovarfunktion (15. ‐25. Tag p.p.) mit zyklischen Progesteronprofilen bei 20,4% der Tiere, 2. verzögerter Beginn der Ovarfunktion, gekennzeichnet durch anund abfallende Progesteronkonzentrationen am Ende des klinischen Puerperiums (≈ 30 Tage p.p.) bei 34,7% der Tiere; 3. erster Anstieg der Progesteronkonzentration weit nach Abschluβ des klinischen Puerperiums (40. bis 72. Tag p.p.) bei 40,8% der Tiere; 4. unveränderter Progesteronbasisspiegel (< 30 ng/ml Milchfett) innerhalb des Probenentnahmezeitraums (bis 72. Tag p.p.) bei 4,1% der Tiere. Der erste Progesteronanstieg bei Kühen in der Anbindehaltung trat später auf als bei den Tieren in der Laufstallhaltung (43,0 ± 16,6 bzw. 36,4 ± 14,4 Tage p.p.). Im Durchschnitt wiesen Kühe mit Störungen in der Geburts‐ und Nachgeburtsphase den ersten deutlichen zyklusähnlichen Progesteronanstieg rund 5 Tage später auf als die ohne Komplikationen (44,8 ± 15,6 gegenüber 40,2 ± 15,1 Tage). Die Inzidenz von Ouarialzysten lag bei Kühen in der Anbindehaltung höher (n = 5) als bei den Tieren im Boxenlaufstall (n = 1). Eine ähnliche Tendenz war bei funktionslosen Ovarien gegeben (Anbindehaltung 4 Kühe, Boxenlaufstallhaltung 1 Kuh). Der Wiederbeginn der Ovarfunktion war bei Färsen (bei frühzeitiger Uterusinvolution) verzögert, ein erster Anstieg der Progesteronkonzentration zeigte sich erst 45,3 ± 13,8 Tage p.p. Demgegenüber lag dieser bei sekundo‐ und pluriparen Kühen bereits 28,1 ± 12,4 bzw. 39,3 ± 15,0 Tage p.p. Bei Kühen ohne Endometritis puerperalis begann die Ovarfunktion 36,2 ± 14,9 Tage p.p. und damit etwa 9 Tage früher als bei Kühen mit Endometritis (45,5 ± 12,2; p ≤ 0,05). Bezüglich ungestörten Geburts‐ und p.p.‐ Verlauf konzipierten die Tiere in der Laufstallhalt...
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