Antibodies to porcine circovirus (PCV) which is the smallest animal virus known so far were found in 77-95 per cent of sera from slaughter pigs gathered in Berlin and two districts of Northern Germany. About 60 per cent of these positive sera had relatively high titres similar to those in experimentally infected pigs 3-6 weeks after infection. This indicates that the animals might have become infected during the fattening period. Sera from 2-3 year old pigs from a laboratory animal breeding institution were also found positive (83 per cent) but titres were lower. Experimentally infected minipigs developed antibodies and virus was isolated from nasal swabs and from fecal samples. The animals neither showed any signs of illness nor were pathological changes noticable. The assumption that PCV is a common virus in all swine populations was strengthened by the finding of PCV antibodies in wild boars shot in the forests of the Berlin region.

Zusammenfassung Durch den Nachweis von Herpesvirus‐equi‐1‐Antigen in der Leber experimentell infizierter Goldhamster konnte die Brauchbarkeit einer direkten und indirekten Immunperoxidase‐Methode zur Lokalisierung von Virusantigen in Organen infizierter Versuchstiere aufgezeigt werden. Die direkte Immunperoxidase‐Technik erbrachte gegenüber der indirekten Methode und der direkten Immunfluoreszenz ein detailreicheres Bild der Verteilung von Herpesvirusantigen im Kern und Zytoplasma infizierter Leberparenchymzellen. Die endogene Peroxidaseaktivität von Entzündungszellen kann den Nachweis der an die Antikörper gebundenen Meerrettichperoxidase stören und muß vor Anwendung der Immunperoxidase‐Technik mit einer H2O2‐haltigen Natriumazid‐Lösung beseitigt werden. Beide Immunperoxidase‐Methoden haben gegenüber der Immunfluoreszenz den Vorteil, daß durch den histochemischen Enzymnachweis ein Farbstoff gebildet wird, der das Anfertigen von Dauerpräparaten und die Verwendung eines gewöhnlichen Lichtmikroskops gestattet. Summary The immunoperoxidase method for detection of viral and chlamydial antigens 1. Basic method and detection of herpes virus equi‐1 antigen in livers of infected hamsters The value of the direct and the indirect immunoperoxidase method for showing local deposits of viral antigen in organs of infected experimental animals was demonstrated with herpes virus equi‐1 antigen in the liver of experimentally infected hamsters. The direct technique gave a more detailed picture of the distribution of the antigen in the nucleus and cytoplasm of the infected liver parenchymal cells than did the indirect method. The endogenous peroxidase activity of inflammatory cells can interfere with the horseradish peroxidase bound to antibody and for this reason the immunoperoxidase technique must be preceded by treatment with sodium azide solution containing H2O2. Both immunoperoxidase methods have the advantage over immunofluorescence that the histochemical demonstration of the enzyme yields a coloured compound that makes it possible to prepare permanent preparations and to use ordinary light microscopy. Résumé La méthode de l'immunoperoxydase dans la recherche des antigènes viraux et de Chlamydia Communication I: Principes de la méthode et mise en évidence de l'antigène viral Herpes equi‐1 dans des foies d'hamsters dorés On a pu montrer la validité d'une méthode directe et indirecte de l'immunoperoxydase pour la localisation d'antigènes viraux dans des organes d'animaux d'expérience infectés par la mise en évidence de l'antigène viral Herpes equi‐1 dans le foie d'hamsters dorés infectés expérimentalement. La technique directe de l'immunoperoxydase a donné une image plus détaillée de la répartition des antigènes viraux Herpes dans le noyau et le cytoplasme des cellules parenchymateuses infectées du foie que la méthode indirecte et l'immunofluorescence directe. L'activité endogène de la peroxydase des cellules inflammatoires peut déranger la mise en évidence de la peroxydase de Meerrettich liée aux anticorps et doit de ce fait ê...

Zusammenfassung Mit der direkten Immunperoxidase‐Methode und der Immunfluoreszenz konnte in Peritonealmakrophagen von Mäusen, die mit dem Psittakosestamm P 121/71 i. p. infiziert worden waren, der 6tägige Entwicklungszyklus des Erregers nachgewiesen werden. Die Immunperoxidase‐Technik zeigte dabei geringere Unspezifitätsreaktionen und ließ in der antigenspezifischen Färbung detailreichere Strukturen erkennen. Die eigentliche Vermehrungsphase der Chlamydien innerhalb der Plaques war am 2. Tag p. i. abgeschlossen. Am 3. Tag p. i. befanden sich die neu gebildeten Elementarkörperchen in Form von Clusters im gesamten Zytoplasma der infizierten Zelle. Zu diesem Zeitpunkt färbt sich mit immunologischen Färbemethoden das gesamte Plasma der Wirtszelle an. Die am 5. Tag p. i. zu beobachtende Morulaform wurde als Versuch der infizierten Zelle interpretiert, die neu gebildeten Elementarkörperchen abzukapseln. Mäuse, die 48 Stunden vor der Infektion eine Gelatinelösung i. p. injiziert bekamen, starben in der Regel am 6. Tag p. i., während nicht vorbehandelte Tiere überlebten. Die Ursache dafür wurde in dem veränderten Verhältnis der Peritonealzellen in der Bauchhöhle zum Infektionszeitpunkt gesehen. 48 Stunden nach einer i. p. Inokulation von Gelatinelösung sind die Granulozyten, die die Chlamydien intrazellulär abbauen, in der Bauchhöhle vermindert, während die für die Infektion empfänglichen Makrophagen in großer Anzahl vorliegen. Dadurch kommen mehr Chlamydien zur Vermehrung, was zu einer tödlichen Erkrankung der Versuchstiere führt. Summary The immunoperoxidase method for detection of viral and chlamydial antigens 2. Demonstration of development cycle of Chlamydia psittaci in peritoneal macrophages of infected mice By the direct immune peroxidase method and immunofluorescence it was possible to demonstrate the 6‐day development cycle of the causal agent in peritoneal macrophages of mice infected i. p. with the psittacosis strain P 121/71. The peroxidase technique was less non‐specific and gave more structural detail in the antigen‐specific staining. The true proliferation phase of chlamydia within the plaques ended on the 2nd day after infection. On the 3rd day there were new elementary bodies in the form of “clusters” throughout the cytoplasm of infected cells. At this time the immunological method showed staining of the whole cytoplasm of the host cell. The “morula” form found on the 5th day after infection was interpreted as an attempt by the host cells to encapsulate the newly formed elementary bodies. Mice injected i. p. 48 hours before infection with a gelatine solution usually died on the 6th day after infection whereas controls survived. The reason is seen in the changed relationship of the peritoneal cells at the time of infection. 48 hours after injecting gelatine i. p. the granulocytes which break down the chlamydia within their cytoplasm are reduced in number in the peritoneal cavity whereas the susceptible macrophages are more numerous. The result is greater multiplication of the chlamydia leading to death of...

Zusammenfassung In der vorliegenden Arbeit wird über den Nachweis von TGE‐Virus in infizierten Schweineschilddrüsen‐Zellkulturen mit Hilfe der Immunperoxidase‐Methode berichtet. In einem Zeitversuch wurden unterschiedliche Infektionsstadien der Schilddrüsenzellen sowohl mit der Immunperoxidase‐ als auch mit der Immunfluoreszenz‐Technik dargestellt. Bei Anwendung der Immunperoxidase‐Methode färbte sich das Zytoplasma infizierter Zellen in Abhängigkeit des Antigengehaltes in unterschiedlichen Brauntönen an. Im Gegensatz zur Immunfluoreszenz gelang es mit Hilfe dieser Technik, etwa 0,5 bis 2 μ große, antigenhaltige Granula im Zytoplasma infizierter Zellen nachzuweisen. Es wird vermutet, daß diese Granula mit den virushaltigen Vesikeln, die bei elektronenoptischen. Untersuchungen infizierter Zellen beobachtet wurden, identisch sind. Summary The immunoperoxidase method for detection of viral and chlamydial antigens III. Demonstration of TGE antigen in pig thyroid cell cultures The demonstration of TGE virus in infected swine thyroid cultures was carried out at different stages of infection by the immunoperoxidase method and by the immunofluorescence technique. The peroxidase method stains the cytoplasm of infected cells varying tones of brown, depending on their antigen content. In contrast to immunofluorescence, the peroxidase technique showed antigen‐containing granules of about 0.5 to 2 μ within the cytoplasm of infected cells. It is suggested that these granules are identical with the virus‐containing vesicles which are seen in infected cells under the electron microscope. Résumé La méthode de l'immunoperoxydase dans la recherche des antigènes viraux et de Chlamydia Communication III: Mise en évidence de l'antigène viral TGE dans des cultures cellulaires de la thyroïde du porc On décrit la recherche du virus TGE dans des cultures de cellules infectées de thyroïde du porc au moyen de la méthode d'immunoperoxydase. On a mis en évidence les différents stades de l'infection des cellules thyroïdiennes aussi bien avec la technique de l'immunoperoxydase que la méthode de l'immunofluorescence. Le cytoplasme des cellules infectées se colora, avec l'emploi de la méthode d'immunoperoxydase, dans des tons bruns variant avec la quantité d'antigène. Au contraire de l'immunofluorescence, cette technique a permis de mettre en évidence des granulations contenant l'antigène d'une taille de 0,5 à 2 μ dans le cytoplasme de cellules infectées. On suppose que ces granulations sont identiques aux vésicules contenant du virus que l'on observe au microscope électronique dans les cellules infectées. Resumen El método de la inmunoperoxidasa para identificar los antígenos virales y de clamidios III° comunicación: Identificación del virus‐antígeno GET en cultivos celulares de tiroides porcinos En el trabajo presente se informa sobre la identificación del virus de la GET en cultivos celulares infectados de tiroides porcinos con ayuda del método de la inmunoperoxidasa. En un ensayo temporal se representaron los diversos estadios de infección de...