Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian hormon 2,4-D dan benzyl amino purin (BAP) terhadap pertumbuhan kalus jeruk kasturi (Citrus microcarpa). Penelitian ini menggunakan metode eksperimen dengan rancangan acak lengkap (RAL) faktorial. Parameter yang diamati adalah persentase tumbuh eksplan, waktu muncul, lebar, dan tekstur kalus. Hasil penelitian persentase tumbuh eksplan dan lebar kalus dianalisis dengan ANOVA dan uji lanjut DMRT pada taraf 5%, sedangkan waktu muncul kalus dan tekstur kalus dilakukan secara deskriptif. Hasil Penelitian menunjukkan bahwa kombinasi hormon D4B1 dan D4B2 menghasilkan waktu muncul kalus tercepat, yaitu 3,3 HSK. Persentase pembentukan kalus tertinggi, yaitu 100% terdapat pada perlakuan D2B0, D2B0.5-D4B0. Rerata lebar kalus tertinggi terjadi pada perlakuan D4B2 dengan lebar kalus 0,97 cm. Kalus embriogenik dihasilkan pada perlakuan D2B1, D2B2, dan D3B0. Perlakuan Kombinasi hormon 2,4-D dan BAP yang terbaik adalah pada perlakuan D2B2 (2 mg/l 2,4-D, dan 2 mg/l BAP) untuk menghasilkan kalus embriogenik sehingga dapat digunakan untuk kultur suspense sel.