No abstract

1 Научно-исследовательский институт (НИИ) онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр (НИМЦ) Российской академии наук Россия, 634009, г. Томск, пер. Кооперативный, 5 2 Сибирский государственный медицинский университет (СибГМУ) Россия, 634050, г. Томск, Московский тракт, 2 РЕЗЮМЕ Введение. Рак яичников (РЯ) является одним из самых агрессивных и тяжело поддающихся лечению онкологических заболеваний. Около 75% случаев РЯ выявляется на поздних стадиях заболевания. Асцитическая жидкость является перспективным биологическим материалом для получения информации о характере опухолевого процесса при РЯ. Перитонеальная диссеминация считается одним из наиболее неблагоприятных факторов прогрессирования злокачественных опухолей. Однако прогностические факторы, связанные со злокачественным асцитом, изучены недостаточно.Целью данного исследования явилась оценка различных популяций опухолевых клеток в асцитической жидкости больных РЯ методом многоцветной проточной лазерной цитометрии на основе молекулярной панели маркеров EpCam, СD45, CD44, CD24, CD133 и N-cadherin. В проспективное исследование включены 16 больных с впервые диагностированным РЯ, стадии Ic-IV по системе FIGO, возраст 36-76 лет, поступившие на лечение в НИИ онкологии Томского НИМЦ. Материалом для исследования служила асцитическая жидкость, стабилизированная ЭДТА, взятая во время лапароскопии. Различные популяции асцитических опухолевых клеток (с признаками стволовости, с признаком ЕМТ (epithelial-mesenchymal transition), без признаков стволовости и ЕМТ, с сочетанием ýтих признаков, а также атипичные / гибридные популяции клеток определяли методом многоцветной проточной лазерной цитометрии на аппарате BDFACSCanto (США) с помощью меченных различными флуорохромами моноклональных антител к EpCam, СD45, CD44, CD24, CD133 и N-cadherin и программного обеспечения BD FACSDiva. В результате исследования в асцитической жидкости больных РЯ было выявлено 12 популяций Ерcam-положительных клеток. Клеточный состав асцитической жидкости больных РЯ представляет собой гетерогенную популяцию. Большую концентрацию асцитических опухолевых клеток представляют собой атипичные / гибридные формы опухолевых клеток с признаком стволовости, а также стволовые опухолевые клетки Epcam+CD45-CD44+CD24+CD133+/-как с признаком ЕМТ, так и без него. Ключевые слова: рак яичников, асцитические опухолевые клетки, стволовые опухолевые клетки, многоцветная проточная цитометрия, жидкостная биопсия. Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи. Источник финансирования. Исследование выполнено при финансовой поддержке гранта Президента РФ МД-544.2018.7. Соответствие принципам этики. Исследование одобрено локальным ýтическим комитетом НИИ онкологии Томского НИМЦ (протокол № 4 от 02.04.2018).

РЕЗЮМЕВведение. Канцероматоз брюшины является одним из наиболее неблагоприятных факторов прогрессирования рака яичников. Он часто сопровождается накоплением жидкости в брюшной полости -асцитом. Прогностические факторы, связанные со злокачественным асцитом, изучены недостаточно.Цель. Оценка различных популяций EpСam-положительных опухолевых клеток в асцитической жидкости, их связь с наличием перитонеальных «инвазивных» имплантатов и степенью распространенности канцероматоза по шкале Predictive Index Value (PIV) у больных раком яичников. Материалы и методы. В проспективное исследование включены 22 больных с впервые диагностированным раком яичников, с Ic-IV стадиями по системе FIGO, в возрасте 36-76 лет, поступившие на лечение в НИИ онкологии Томского НИМЦ. Материалом для исследования служила асцитическая жидкость, стабилизированная ЭДТА, взятая во время лапароскопии. Количество различных популяций опухолевых клеток в асцитической жидкости определяли методом многоцветной проточной цитометрии и проточной цитометрии с визуализацией. Степень канцероматоза определяли по шкале PIV.Результаты. Показано, что клеточный состав асцитической жидкости больных раком яичников представляет собой гетерогенную популяцию. Положительная корреляционная связь с PIV, характеризующим степень распространенности канцероматоза, наблюдалась у асцитических клеток с фенотипом EpCam+CD45-CD44-CD24+CD133-Ncadherin+ (r = 0,58; p = 0,004) и у атипичных/гибридных форм клеток EpCam+CD45+CD44+CD24+/-CD133+/-Ncadherin+/-(r = = 0,51; р = 0,01).Заключение. Полученные результаты показывают большую гетерогенность опухолевых клеток в асцитической жидкости больных раком яичников. Обнаруженный факт наличия атипичных (гибридных форм) EpCam-положительных клеток представляет интерес для клеточной биологии и требует дальнейших исследований. Ключевые слова: гетерогенность опухолевых клеток, канцероматоз, Predictive Index Value, асцитическая жидкость, рак яичников, жидкостная биопсия. Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи. Источник финансирования. Исследование выполнено при финансовой поддержке Президента РФ (грант № МД-2017.2020.7). Соответствие принципам этики. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании. Исследование одобрено локальным этическим комитетом НИИ онкологии Томского НИМЦ (протокол № 4 от 02.04.2018).