Цель. Установить частоту выявления молекулярно-генетических маркеров устойчивости к антибактериальным лекарственным средствам группы полимиксинов (колистину) в бактериальных культурах Klebsiella pneumoniae. Материалы и методы. В бактериальных культурах K. pneumoniae проводили определение нуклеотидной последовательности гена mgrB с применением анализа кривых плавления, электрофореза и сиквенс-анализа. Для генов phoP, phoQ и pmrK определяли процент уровня нормализованной экспрессии данных генов с использованием метода ПЦР с обратной транскрипцией и расчета ΔΔCt. Выявление мобильных плазмидных генетических элементов устойчивости mcr проводили с применением метода ПЦР в режиме реального времени. Результаты. В исследованных бактериальных культурах K. pneumoniae нарушения структуры гена mgrB были выявлены в трех вариантах: полная делеция локуса гена (10,45%), делеция части локуса гена (10,00%), вставка инсерционных последовательностей (10,91%). Изменения структуры гена mgrB были обнаружены в 85,19% колистинрезистентных изолятов. Выявлены изоляты K. pneumoniae с гиперэкспрессией (уровень нормализованной экспрессии больше 100%) гена PhoQ (31,94%) и гена pmrK (3,70%). Для гена pmrK было зафиксировано отсутствие экспрессии в 6,94% проанализированных образцов, для гена PhoP отсутствие экспрессии было выявлено в 19,91% образцов. В исследованных бактериальных культурах K. pneumoniae не было зафиксировано присутствия генов семейства mcr. Заключение. В ходе проведенного исследования установлено, что такие молекулярно-генетические маркеры, как повышенная экспрессия генов двухкомпонентных систем phoPQ и pmrAB (PhoQ и/или pmrK), а также изменения в структуре гена mgrB (инсерции или делеции) выявляются у изолятов K. pneumoniae, резистентных к колистину, в то же время в изученных образцах не было выявлено генетических элементов (mcr гены), отвечающих за плазмидопосредованные механизмы формирования резистентности к полимиксинам (колистину). Purpose. To establish the rate of detecting resistance molecular genetic markers to antibacterial drugs of the polymyxins group (colistin) identification in bacterial cultures of Klebsiella pneumoniae. Materials and methods. In bacterial cultures of K. pneumoniae (n=220), the nucleotide sequence of the mgrB gene was determined using melting curve analysis, electrophoresis, and sequence analysis. For the phoP, phoQ, and pmrK genes, the percentage of normalized expression of these genes was determined using reverse transcription PCR and ΔΔCt calculation. Detection of mcr mobile plasmid genetic elements of resistance was carried out using real-time PCR. Results. In the studied bacterial cultures of K. pneumoniae, structural disorders of the mgrB gene were detected in three variants: complete gene locus deletion (10.45%), a part of the gene locus deletion (10.00%), and insertion sequences (10.91%). Changes in the mgrB gene structure were detected in 85.19% of colistin-resistant isolates. Isolates of K. pneumoniae with overexpression (the level of normalized expression being more than 100%) of the PhoQ gene (31.94%) and the pmrK gene (3.70%) were identified. For the pmrK gene, the absence of expression was recorded in 6.94% of the analyzed samples; for the PhoP gene, the absence of expression was detected in 19.91% of samples. In the studied bacterial cultures of K. pneumoniae, the presence of the mcr family genes was not recorded. Conclusion. The study revealed that such molecular genetic markers as increased expression of the genes of the two-component systems phoPQ and pmrAB (PhoQ and/ or pmrK), as well as changes in the structure of the mgrB gene (insertions or deletions) were detected in K. pneumoniae isolates resistant to colistin; at the same time, no genetic elements (mcr genes) responsible for plasmid-mediated mechanisms of resistance formation to polymyxins (colistin) were found in the studied samples.
Klebsiella pneumoniae является одним из основных возбудителей инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи в Республике Беларусь. Ключевой проблемой лечения инфекций, вызванных данным микроорганизмом, в настоящее время является высокий уровень устойчивости к антибактериальным лекарственным средствам, в том числе карбапенемам, аминогликозидам, фторхинолонам, растущая устойчивость к колистину.В статье рассматриваются основные механизмы устойчивости микроорганизмов к антибиотикам, характеризуются возможности и потенциальные преимущества вертикального и горизонтального пути передачи механизмов устойчивости. Основной упор делается на бета-лактамазы, обуславливающие устойчивость к карбапенемам (карбапенемазы): металло-бета-лактамазы, оксациллиназы, бета-лактамазы группы А, а также делается акцент на возможности наличия у Klebsiella pneumoniae других механизмов устойчивости. Отдельно описывается mgrB-ассоциированный механизм устойчивости к колистину. Устойчивость к карбапенемам и/или колистину распространяется в настоящее время с большой скоростью, приводя к развитию значимых вспышек инфекций, вызванных внебольничными и/или нозокомиальными штаммами Klebsiella pneumoniae, а также неэффективности лечения. Klebsiella pneumoniae is one of the leading causes of healthcare-associated infections in the Republic of Belarus. The main challenge currently related to treatment of Klebsiella pneumoniae-associated infections is high level of resistance to antimicrobials, including carbapenems, aminoglycosides, fluoroquinolones, as well as emerging resistance to colistin. Thisreviewisfocusedonβ-lactamasesmediatedcarbapenemresistance(carbapenemases), including metallo-β-lactamases, oxacillinases, type A β-lactamases. It is also stressed the role of non-β-lactamase mechanisms in carbapenem resistance. mgrB-associated colistin resistance, essential antibiotic resistance mechanisms, features and potential advantages of horizontal and vertical resistance gene transfers are also described.Carbapenem and/or colistin resistance are spreading at an alarming rate, resulting in major outbreaks and treatment failure of community-acquired and/or nosocomial infections caused by Klebsiella pneumoniae strains.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
customersupport@researchsolutions.com
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
This site is protected by reCAPTCHA and the Google Privacy Policy and Terms of Service apply.
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.