Os fungos são utilizados em processos fermentativos para obtenção de diferentes biocompostos. Espécies de Penicillium vêm se destacando por serem fontes de biocatalisadores e compostos antimicrobianos de interesse industrial. O objetivo desse trabalho foi avaliar a produção de enzimas e antimicrobianos por três espécies de Penicillium pertencentes ao acervo da Coleção de Fungos da Amazônia, do Instituto Leônidas e Maria Deane. A autenticação das culturas de P. citrinum CFAM 47, P. oxalicum CFAM 1311 e P. purpurogenum CFAM214 foi feita com base nas características macro e micromorfológicas. A avaliação da síntese de amilase, celulase e protease foi realizada em meio de cultivo sólido. Os halos de degradação foram medidos com régua graduada e os resultados expressos em milímetros. A atividade enzimática foi determinada pelo índice de atividade enzimática (IAE). Para avaliação da síntese de antimicrobianos, os fungos foram cultivados nos seguintes meios líquidos: batata dextrose (BDL), extrato de levedura sacarose (YES), International Streptomyces Project 2 (ISP2) e Sabouraud (SB). O bioprocesso foi conduzido a 28 ºC por 15 dias, em condições estacionárias. Os extratos obtidos do cultivo submerso foram testados contra leveduras (Candida albicans e Candida tropicalis), bactérias Gram-positivas (Enterococcus faecalis e Staphylococcus aureus) e Gram-negativas (Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa). Penicillium purpurogenum CFAM214 foi o produtor significativo de amilase (54,30 mm). As três espécies sintetizaram proteases, sem diferença significativa entre os tamanhos dos halos de hidrólise. Nas condições avaliadas, as espécies de Penicillium não produziram celulases. Penicillium citrinum CFAM 47 apresentou IAE (1,24) significativo para amilase. Em relação à atividade proteolítica, não foi observada diferença significativa entre os IAE. O extrato de P. purpurogenum CFAM214 apresentou atividade contra C. albicans, C. tropicalis e E. feacalis. Penicillium citrinum CFAM 47 cultivado em SB e P. oxalicum CFAM 1311 mantido em ISP2 e YES também demostraram ação contra C. tropicalis. Não foi observada atividade dos extratos frente a E. coli e P. aeruginosa. Logo, verifica-se que as espécies de Penicillium avaliadas demonstram ser fontes renováveis de enzimas e compostos antimicrobianos com potencial aplicabilidade industrial.