Culture-Independent Species Typing of Neotropical
 Leishmania
 for Clinical Validation of a PCR-Based Assay Targeting Heat Shock Protein 70 Genes

García, Lineth; Kindt, A.; Bermúdez, H.; Llanos-Cuentas, Alejandro; Doncker, Simonne De; Arévalo, Jorge; Tintaya, Kelly Wilber Quispe; Dujardin, Jean Claude

doi:10.1128/jcm.42.5.2294-2297.2004

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“…Various studies have suggested the usefulness of molecular techniques for the aetiological diagnosis of ATL (Pirmez et al 1999, de Oliveira et al 2003, Schonian et al 2003, Garcia et al 2004, Marques et al 2006, Gomes et al 2008, Luz et al 2009). In different studies conducted on humans, the sensitivity of the polymerase chain reaction (PCR) was about 100%, whereas 60% was observed for other types of exams.…”

mentioning

confidence: 99%

Evaluation of polymerase chain reaction in the routine diagnosis for tegumentary leishmaniasis in a referral centre

Fagundes¹,

Schubach²,

Paula³

et al. 2010

Mem. Inst. Oswaldo Cruz

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confidence: 99%

Evaluation of polymerase chain reaction in the routine diagnosis for tegumentary leishmaniasis in a referral centre

Fagundes¹,

Schubach²,

Paula³

et al. 2010

Mem. Inst. Oswaldo Cruz

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“…Con el protocolo diseñado por García, et al (11), se han reportado nuevas restricciones enzimáticas basadas en la misma PCR, que permitieron distinciones aún no registradas de especies o grupos de especies. Así, se propusieron nuevas enzimas para distinguir entre las especies predominantes en Brasil, fundamentalmente del subgénero L. (Viannia) (23), y otras para identificar especies no estudiadas con anterioridad procedentes del Nuevo o del Viejo Mundo (15).…”

Section: Discussionunclassified

“…En este contexto, la variante PCR-hsp70/RFLP basada en el gen hsp70, propuesta por García, et al (11), y modificada posteriormente, detecta 14 especies de importancia médica usando un solo par de cebadores y, a partir de un único producto de amplificación, logra identificar individualmente la mayoría de dichas especies mediante una o dos restricciones enzimáticas (15). Esta variante se ha aplicado tanto al análisis de cepas como al de muestras clínicas humanas (16).…”

Section: Molecular Identification Of Leishmania Spp In Clinical Isolunclassified

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Identificación molecular de aislamientos clínicos de Leishmania spp. procedentes de Colombia con base en el gen hsp70

et al. 2016

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Introducción. La leishmaniasis es una enfermedad de alta prevalencia en Colombia, donde al menos seis especies diferentes pueden causar una variada presentación clínica en el humano. La tipificación de la especie es importante no solo desde el punto de vista epidemiológico, sino en el diagnóstico, dado que el tratamiento y el esquema de tratamiento pueden variar dependiendo de la especie identificada. Para la identificación se han utilizado distintas alternativas metodológicas, con variable poder discriminatorio.Objetivo. Realizar la identificación molecular de especies de Leishmania spp. mediante la amplificación molecular de un fragmento del gen hsp70.Materiales y métodos. Se realizó la amplificación molecular de un fragmento del gen hsp70: PCR-hsp70 (siglas en inglés) seguida del análisis del tamaño de los fragmentos de restricción (RFLP siglas en inglés), a 81 aislamientos clínicos de Leishmania spp., provenientes de pacientes con enfermedad cutánea y mucocutánea, en los cuales se identificaron las especies presentes.Resultados. Se obtuvo un único producto de amplificación para el total de muestras analizadas. La restricción enzimática permitió identificar 70 aislamientos con un patrón de bandas correspondiente a Leishmania braziliensis, que incluye dos patrones diferentes (62 y 8 aislamientos respectivamente); 9 aislamientos compatibles con Leishmania panamensis y 2 con Leishmania guyanensis. El origen geográfico de los aislamientos concuerda con reportes anteriores sobre la distribución de las especies correspondientes.Conclusiones. La técnica de PCR-hsp70/RFLP utilizada es útil para identificar especies de Leishmania aisladas de muestras clínicas de Colombia que puede ser aplicable también al estudio de cepas provenientes de vectores y reservorios con importancia epidemiológica.

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“…22,28,29,33,[62][63][64] The sensitivity varies according to the PCR protocol used, but in all cases, PCR proved to be more sensitive and specific in detecting Leishmania parasites compared with culture, microscopy, or clinical diagnosis (especially for ML). Similar to parasite culture, however, the use of PCR in Bolivia is limited to research purposes or epidemiologic studies because of the cost and need for specialized laboratory infrastructure and technically trained staff.…”

Section: Disease Distribution Notification and Incidencementioning

confidence: 99%

Leishmaniases in Bolivia: Comprehensive Review and Current Status

García

Parrado²,

Rojas³

et al. 2009

The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene

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Abstract. The leishmaniases are protozoan, zoonotic diseases transmitted to human and other mammal hosts by the bite of phlebotomine sandflies. Bolivia has the highest incidence of cutaneous leishmaniasis (CL) in Latin America (LA), with 33 cases per 100,000 population reported in 2006. CL is endemic in seven of the country's nine administrative departments. Visceral leishmaniasis (VL) is comparatively rare and is restricted to one single focus. Most CL cases are caused by Leishmania ( Viannia ) braziliensis (85% cases); VL is caused by L. (L.) infantum. Seven sandfly species are incriminated as vectors and Leishmania infections have been detected in several non-human mammal hosts. Transmission is associated with forest-related activities, but recently, cases of autochthonous, urban transmission were reported. Because most cases are caused by L. (V.) braziliensis, Bolivia reports the greatest ratio (i.e., up to 20% of all cases) of mucosal leishmaniasis to localized CL cases in LA. Per national guidelines, both CL and VL cases are microscopically diagnosed and treated with pentavalent antimony.

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Culture-Independent Species Typing of Neotropical Leishmania for Clinical Validation of a PCR-Based Assay Targeting Heat Shock Protein 70 Genes

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Evaluation of polymerase chain reaction in the routine diagnosis for tegumentary leishmaniasis in a referral centre

Evaluation of polymerase chain reaction in the routine diagnosis for tegumentary leishmaniasis in a referral centre

Identificación molecular de aislamientos clínicos de Leishmania spp. procedentes de Colombia con base en el gen hsp70

Leishmaniases in Bolivia: Comprehensive Review and Current Status

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