Diagnóstico microscópico de neumonía por Pneumocystis jirovecii en muestras de lavado broncoalveolar y lavado orofaríngeo de pacientes inmunocomprometidos con neumonía

Abstract

Introducción. El diagnóstico de neumonía por Pneumocystis jirovecii se fundamenta en la visualización microscópica del hongo en secreciones respiratorias. Técnicas moleculares recientes también lo han detectado en muestras de orofaringe, pero su utilidad diagnóstica es discutible. En Colombia, hay poca información al respecto. Objetivo. Comparar el rendimiento de dos coloraciones, azul de toluidina O e inmunofluorescencia directa, en muestras de lavado broncoalveolar y lavado orofaríngeo en pacientes inmunocomprometidos con neumonía. Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio transversal de evaluación de pruebas diagnósticas en 166 pacientes inmunocomprometidos con sospecha de neumonía por P. jirovecii. Por protocolo, las muestras de lavado broncoalveolar y orofaríngeo se citocentrifugaron y se colorearon con azul de toluidina e inmunofluorescencia. Se determinó la proporción de resultados positivos con ambas tinciones en cada una de las muestras, y la concordancia entre ellas. Resultados. Se detectaron 24 casos de neumonía por P. jirovecii en las muestras de lavado broncoalveolar (14,5 %), 21 de los cuales fueron positivos por ambas pruebas, mientras que tres casos se detectaron sólo por inmunofluorescencia. Ninguna de las 166 muestras de lavado orofaríngeo fue positiva por cualquiera de estas técnicas. Al comparar las proporciones de resultados positivos, no se encontraron desacuerdos significativos (p=0,63). La concordancia (coeficiente kappa) entre ellas fue de 0,92 (IC 95% : 0,84-1). Conclusiones. Ambas coloraciones son útiles para diagnosticar neumonía por P. jirovecii en muestras de lavado broncoalveolar. Sin embargo, el azul de toluidina no detecta, aproximadamente, el 12 % de los casos positivos por inmunofluorescencia. Las muestras de lavado orofaríngeo no son apropiadas para detectar microscópicamente P. jirovecii.Palabras clave: neumonía por Pneumocystis/diagnóstico, técnica del anticuerpo fluorescente directa, cloruro de tolonio, orofaringe, lavado broncoalveolar, huésped inmunocomprometido. Microscopic diagnosis of Pneumocystis jirovecii pneumonia in bronchoalveolar lavage and oropharyngeal wash samples of immunocompromised patients with pneumoniaIntroduction. The diagnosis of Pneumocystis jirovecii pneumonia is based on observation of the microorganism using several staining techniques in respiratory samples, especially bronchoalveolar lavage and induced sputum. Recently, the fungus also has been detected in oropharyngeal wash samples, but only using molecular tests. Objective. The diagnostic yield of two microscopic stains, toluidine blue O and direct fluorescent antibody, was compared in bronchoalveolar lavage and oropharyngeal wash samples for the detection of P. jirovecii in immunocompromised patients with pneumonia. Materials and methods. Cross-sectional evaluation diagnostic tests were used in 166 immunossupressed patients with suspected P. jirovecii. By protocol, bronchoscopic bronchoalveolar lavage and oropharyngeal wash samples were prepared by cytocentrifugation, and slides were st...

Criobiopsia como método diagnóstico de neumonía por Pneumocystis jirovecii

“…[6] En la década de los ochenta, se introduce como técnica diagnóstica para neumonía por Pneumocystis la broncoscopia y el lavado broncoalveolar (BAL, por sus siglas en inglés). [7] Al estudiarse este método y todo aquel que depende de análisis histopatológico, se debe plantear la incertidumbre de los factores técnicos y de disposición de insumos, ya que la sensibilidad de la prueba depende de estas variables. La cantidad de muestra, la lectura adecuada del tejido y las tinciones aplicadas son cruciales.…”

“…Este procedimiento aunado a la biopsia transbronquial solidificaba el diagnóstico; no obstante, al pasar del tiempo y la tecnología, tomando en cuenta costos y complicaciones, se favorecía cada vez más solo realizar BAL para el diagnóstico de PCP, siempre y cuando se cuenten con insumos, equipo y personal capacitado. [7,9] Aproximadamente 20 años atrás, se desarrolló una nueva estrategia mínimamente invasiva para la toma de muestras; al inicio fue específicamente diseñada para la toma de biopsia en enfermedades intersticiales pulmonares y, eventualmente, ha ganado terreno en otras aplicaciones. La criobiopsia es una tecnología en asiduo estudio y en cuyo inicio tenía altos porcentajes de complicaciones atribuibles, según algunos expertos, a la curva de aprendizaje.…”

Diagnóstico microbiológico en lavado broncoalveolar. Revisión de la literatura

“…Por otra parte, el TBO es una coloración metacromática que tiñe los proteoglicanos de la pared de las levaduras y hongos, además, es más fácil de realizar que la plata metenamina y posee una sensibilidad similar a la de la inmunofluorescencia. Se usa principalmente para P. jirovecii donde tiñe los esporoquistes, cuya apariencia es de gránulos, de tonalidad azul-lila, ovalados, con una hendidura central, que se agrupan en forma de panal [42] (figura 8), pero también se pueden observar otras levaduras como las multigemantes de P. braziliensis, y levaduras unigemantes polimórficas y de doble pared de C. neoformans (figura 9), por lo cual su rendimiento diagnóstico también recae en la experticia del laboratorio que la realiza.…”

Valor diagnóstico del estudio médula ósea en pacientes VIH

“…En Medellín Vélez y colaboradores encontraron mejores resultados con inmunofluorescencia directa que con azul de toluidina en lavado broncoalveolar. (11). En histoplasmosis a más del examen directo y en estudios tisulares, las pruebas serológicas de anticuerpos son de bajo valor en infecciones agudas, pero contamos en nuestro medio con la detección de antígeno medido por ensayo inmunoanálisis en suero y en orina con sensibilidad de 86% y especificidad de 94% en estudio de 28 pacientes con sida e histoplasmosis (12) El antígeno aspergilar, galactomannan es más sensible que el cultivo, es de amplio uso en monitoreo y diagnóstico de pacientes con leucemia con sensibilidad muy variable (17-100%), pues tiene falsos negativos en pacientes recibiendo profilaxis o tratamiento antimicótico y falsos positivos dependientes de dieta y medicamentos, su valor predictivo positivo es dependiente de la prevalencia de la enfermedad y se debe hacer seriado (10).…”