High Throughput Screening against the Peroxidase Cascade of African Trypanosomes Identifies Antiparasitic Compounds That Inactivate Tryparedoxin

Abstract

Background: Hydroperoxide detoxification in African trypanosomes relies on a cascade composed of trypanothione, trypanothione reductase, tryparedoxin, and tryparedoxin peroxidases. Results: A library screening against the peroxidase system unraveled trypanocidal compounds that inactivate tryparedoxin in vitro and in the intact parasite. Conclusion: Tryparedoxin is a druggable target. Significance: Detection of novel target molecules is a crucial step to overcome the unsatisfactory chemotherapy of sleeping sickness.

Molecular characterization and interactome analysis of Trypanosoma cruzi tryparedoxin II

“…1-B). These results indicate the essential role of C-terminal cysteine (Cys 45 in TcTXNII) in the resolution of protein mixed disulfides, which correlates with previously published data on the catalytic mechanism of TXNs [15,18,22]. …”

Dipeptidyl Nitroalkenes as Potent Reversible Inhibitors of Cysteine Proteases Rhodesain and Cruzain

“…23,24 All three compounds were found to exhibit good antitrypanosomal activity in the low micromolar range. The increasing EC 50 values during time may be a result of instability of the compounds in the medium after >24 h. In summary, we report dipeptidyl nitroalkenes as a new type of highly potent covalent reversible inhibitors of cysteine proteases.…”

Inhibitor‐induzierte Dimerisierung einer essentiellen Oxidoreduktase aus afrikanischen Trypanosomen

“…[2] Eine Thiol-Austauschreaktion im aktiven Zentrum von Tpx, WC 40 PPC 43 ,i st an der Reduktion von Peroxidasen und der Detoxifizierung von Hydroperoxiden beteiligt und schützt so den Parasiten vor oxidativen Schäden (Schema 1). [4] Unsere in der parasitären Zellkultur ermittelten EC 50 -Werte stimmen mit bereits publizierten Daten überein (Abbildung S1a). [3] Die kovalente Interaktion des selektiven Inhibitors (2-(Chlormethyl)-5-(4-fluorphenyl)thieno [2,3-d]pyrimidin-4-(3H)-on, CFT)mit C40 des aktiven Zentrums von Tpx wurde sowohl in vitro als auch in vivo beschrieben (Abbildung 1 sowie Abbildung S1 in den Hintergrundinformationen).…”

“…Ebenso liefert die Kaskade Reduktionsäquivalente fürdie DNA-Synthese und die Proteinreparatur, welche überlebenswichtig fürden pathogenen Metabolismus und die Proliferation sind. [4] Die Aktivitätv on Tpx und die Effizienz der Inhibition durch CFT wurden in vitro photometrisch durch die Abnahme von NADPH in der rekonstituierten Detoxifi-Schema 1. a) Die Detoxifizierungskaskade fürHydroperoxide in T. brucei besteht aus dem Elektronendonor NADPH, Trypanothion-Reduktase (TR), Trypanothion (TS 2 /T(SH) 2 ), der Oxidoreduktase Tryparedoxin (Tpx) und Peroxidasen (Px). [4] Unsere in der parasitären Zellkultur ermittelten EC 50 -Werte stimmen mit bereits publizierten Daten überein (Abbildung S1a).…”

“…[3] Die kovalente Interaktion des selektiven Inhibitors (2-(Chlormethyl)-5-(4-fluorphenyl)thieno [2,3-d]pyrimidin-4-(3H)-on, CFT)mit C40 des aktiven Zentrums von Tpx wurde sowohl in vitro als auch in vivo beschrieben (Abbildung 1 sowie Abbildung S1 in den Hintergrundinformationen). [4] Unsere in der parasitären Zellkultur ermittelten EC 50 -Werte stimmen mit bereits publizierten Daten überein (Abbildung S1a). [4] Die Aktivitätv on Tpx und die Effizienz der Inhibition durch CFT wurden in vitro photometrisch durch die Abnahme von NADPH in der rekonstituierten Detoxifi-Schema 1. a) Die Detoxifizierungskaskade fürHydroperoxide in T. brucei besteht aus dem Elektronendonor NADPH, Trypanothion-Reduktase (TR), Trypanothion (TS 2 /T(SH) 2 ), der Oxidoreduktase Tryparedoxin (Tpx) und Peroxidasen (Px).…”