Monoclonal antibody testing of lymphocytes after overnight storage

Bj, Weiblen; DeBell, Karen E.; Giorgio, Albert; Valeri, C. R.

doi:10.1016/0022-1759(84)90183-2

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“…Specimens should be kept a t room temperature (18-22°C) and transported to the Flow Cytometry Laboratory as soon as possible (7)(8)(9)(10)(11)(12)(13) 3.03d. Lymphocytes are defined as CD4!jbright 3.03e.…”

Section: Specimen Collection and Handlingmentioning

confidence: 99%

Guideline for flow cytometric immunophenotyping: A report from the national institute of allergy and infectious diseases, division of AIDS

Denny²,

et al. 1993

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Section: Specimen Collection and Handlingmentioning

confidence: 99%

Guideline for flow cytometric immunophenotyping: A report from the national institute of allergy and infectious diseases, division of AIDS

Denny²,

et al. 1993

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“…Faldyna et al (2001) Nicholson et al (1984). Por outro lado, muitos autores relataram mudanças resultantes do armazenamento das amostras de sangue (Weiblen et al 1984, Ekong et al 1992. Muitas dessas mudanças podem ser explicadas, pelo menos em parte, pela contaminação do "gate" de linfócitos por neutrófilos (Van Lambalgen & Van Meurs 1985).…”

Section: Discussionunclassified

Quantificação de subpopulações linfocitárias no sangue periférico de cães sadios adultos

et al. 2017

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RESUMO: A citometria de fluxo vem se firmando como uma ferramenta útil na prática médico-veterinária, particularmente na clínica de pequenos animais. Tal conhecimento tem ensejado o estabelecimento de valores fisiológicos para diferentes subpopulações linfocitárias, indispensáveis à compreensão da dinâmica da celularidade linfóide, em diversas situações patológicas. Assim sendo, o presente ensaio teve como objetivo imunomarcar, por intermédio da técnica citométrica, as subpopulações linfocitárias CD5+CD4+, CD5+CD8+ e CD21+, em quatro diferentes raças de cães domésticos e sadios, de tal forma a agregar informações sobre o perfil imunológico das diferentes raças. Foram utilizados 40 cães adultos (2-7 anos), machos e fêmeas, das raças Beagle (G1, n=10), Golden Retriever (G2, n=10), Bulldog Inglês (G3, n=10) e sem raça definida (SRD) (G4, n=10). As colheitas de sangue foram realizadas por venipunção jugular, utilizando-se sistema de frascos a vácuo (K2-EDTA). O hemograma e o processamento das amostras para citometria de fluxo foram realizados num prazo máximo de 24 horas após a colheita do sangue. As amostras foram analisadas no citofluorômetro FACSCANTO (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA). Utilizou-se o programa FACSDiva (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA), para identificar e quantificar as células CD5+CD4+, CD5+CD8+ e CD21+, que forneceu o histograma e respectiva tabela com a quantidade de células detectadas pela imunofenotipagem. Os dados obtidos para contagem de linfócitos T auxiliares, T citotóxicos/supressores e linfócitos B foram tabulados e submetidos a Análise de Variância pelo teste F. O teste de Tukey a 5% de probabilidade foi utilizado para comparação das médias entre as diferentes raças de cães. Os valores médios de contagens de células CD5+CD8+ no sangue periférico do G1, G2, G3 e G4 foram de 155, 206, 544 e 503 células/μL, respectivamente. Os valores médios de contagens de células CD5+CD4+ no sangue periférico do G1, G2, G3 e G4 foram de 746, 642, 1101 e 855 células/μL, respectivamente. Os valores médios de contagens de células CD21+ no sangue periférico do G1, G2, G3 e G4 foram de 171, 299, 494 e 403 células/μL, respectivamente. Assim sendo, o número médio de células obtido para a subpopulação de linfócitos T citotóxicos foi significativamente maior (p<0,05) nos Bulldogs Ingleses e cães SRD, comparativamente aqueles encontrados nos grupos de Beagles e Golden Retrievers. Ademais, observou-se que o número médio de células obtido para a subpopulação de linfócitos B foi significavamente maior (p<0,05) nos Bulldogs Ingleses, quando comparado àquele dos Beagles.

show abstract

“…No present method really guarantees successful freezing of clones that will enable absolute recovering of the clone upon request as in the original culture. A number of methods for freezing viable cells have been described, but because of the immense importance of this issue, it is recommended that several methods be tried, checking their efficiency for active clone preservation (61)(62)(63). Precautionary measures are important, not only with regard to freezing methods, but also in storing frozen vials, which should be dispersed in several freezing facilities in case of accidental failure of one of them.…”

Section: Freezingmentioning

confidence: 98%