Padronização Das Condições Para a Extração Automatizada Do Dna De Flebotomíneos No Laboratório Central De Saúde Pública Da Bahia

Abstract

A escassez de informações dos fatores envolvidos na interação vetor-parasitahospedeironas áreas endêmicas de leishmanioses na Bahia dificulta substancialmente aaplicação de medidas de controle desse agravo. O diagnóstico molecular da infecção naturaldos vetores das leishmanioses surge como uma alternativa para analisar os flebotomíneosprovenientes das atividades da Rede Estadual de Vigilância Entomológica da Bahia.Para tanto, é de fundamental importância padronizar as condições para a detecção do DNAdos flebotomíneos no processo de extração. O presente trabalho objetivou padronizar ascondições para a extração automatizada do DNA de flebotomíneos no Laboratório Centralde Saúde Pública da Bahia (LACEN-BA). O material recebido pelo Núcleo de Entomologiado LACEN-BA foi triado e 100 exemplares de flebotomíneos machos foram previamenteacondicionados em álcool a 70%. Os exemplares foram separados em amostras com pools de10 flebotomíneos. Cada amostra foi macerada em 80μL de tampão de lise para realização daextração automatizada de DNA no EasyMAG®. Foram realizados PCRs com primers capazesde detectar genes específicos de flebotomíneos que regulam sua cacofonia. A detecção dosprodutos da PCR foi feita por meio de eletroforese em gel de agarose (1%), com produto de amplificação dos alvos testados de 220pb. A eletroforese permitiu a observação do DNA amplificado de gene cacofonia de flebotomíneos, evidenciando o sucesso da técnica de extração automatizada do DNA dos vetores das leishmanioses no LACEN-BA. Este trabalho contribuirá nos estudos epidemiológicos futuros acerca da identificação dos parasitas envolvidos nos ciclos epidemiológicos das leishmanioses no estado.