Rapid analysis of volatiles in fat-containing matrices for monitoring bioprocesses

Schimanski, Silke; Krings, Ulrich; Berger, Ralf G.

doi:10.1007/s00217-013-2047-1

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“…Analysis was performed via thermodesorption-gas chromatography-mass spectrometry and olfactometry (TDS-GC-MS/O), as described below (cf. 6.3.5) (Schimanski, 2013). Semi-quantification was performed using an internal standard (methyl dodecanoate), with a final concentration of 50 µg/mL.…”

Section: Extraction Of Volatilesmentioning

confidence: 99%

Biokatalytische Entstehung von Sesquiterpenoiden

Püth,

Berger,

Krings

et al. 2024

Lebensmittelchemie

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Aromastoffe spielen eine Schlüsselrolle in der Lebensmittelindustrie und bei der Kaufentscheidung der Verbraucher. Dabei achten Kunden verstärkt auf die Natürlichkeit der Produkte und nachhaltige Herstellungsverfahren. Um diesen Vorgaben nachzukommen, rücken höhere Pilze als Produzenten von natürlichen Aromastoffen sowie als Quelle für lebensmitteltechnologisch relevante Enzyme zur Herstellung und Qualitätsverbesserung von Lebensmitteln in den Fokus.Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurde der Basidiomycet Cerrena unicolor (Cun) als Sesquiterpenproduzent untersucht. Im Genom des Pilzes konnten mit Hilfe von Sequenzvergleichen 14 Sesquiterpensynthasen (STS) identifiziert werden. Zehn von ihnen wurden anschließend erfolgreich heterolog in Escherichia coli exprimiert, die Enzyme produziert und funktionell charakterisiert. Mittels tryptischem Verdau und anschließendem peptide mass fingerprinting konnten die vorhergesagten Proteinsequenzen bestätigt werden. Die Sequenzvergleiche zeigten STS‐typische konservierte Motive sowie möglicherweise für Cun spezifische Homologien. Für die Untersuchung der Metallionenabhängigkeit wurden zwei STS aus Cun gewählt, die sich sowohl in der Anzahl der Produkte, als auch den produzierten Sesquiterpenen selbst unterschieden. Setzte man andere bivalente Metallionen als Mg2+ für die Zyklisierungsreaktion ein, zeigte sich, dass die ausgewählte Multiprodukt‐Cyclase promiskuitiver als die Cyclase mit nur einem Sesquiterpen als Produkt reagierte.Weiterhin konnte gezeigt werden, dass agro‐industrielle Nebenströme für die Kultivierung von Cun verwendet werden können und diese Einfluss auf die Sesquiterpenbiosynthese hatten. Eher kohlenhydratreiche Nebenströme wie Kartoffelstärke oder Weizenkleie hatten keinen positiven Einfluss auf die Produktausbeute. Für den lipidhaltigen Rapspresskuchen konnte jedoch eine deutliche Erhöhung der Produktausbeute nachgewiesen werden. Die Hypothese, dass durch β‐Oxidation der Lipide ein Überfluss an Acetyl‐CoA die Sesquiterpenproduktion boostet, konnte mittels 13C‐markiertem Acetat als Medienzusatz experimentell bestätigt werden.

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Section: Extraction Of Volatilesmentioning

confidence: 99%

Biokatalytische Entstehung von Sesquiterpenoiden

Püth,

Berger,

Krings

et al. 2024

Lebensmittelchemie

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Advances in the Analysis of Volatile Isoprenoid Metabolites

Wüst

2014

Biotechnology of Isoprenoids

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The advances in the analysis of volatile isoprenoid metabolites from sample preparation to separation and detection over the past 3 years are discussed in this overview. Novel headspace sampling techniques like the so-called high concentration capacity techniques are compared with the classical liquid extraction and distillation methods. The advantages of multidimensional separation techniques in the analysis of complex samples are outlined and commercially available dedicated heart-cutting and comprehensive GC systems are described.

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