Los estudios de mamíferos grandes y medianos basados en metodologías sistemáticas y técnicas estandarizadas han abarcado escasas localidades en la provincia de Guayas, donde existen acelerados procesos de urbanización, fragmentación ecológica y presencia de especies introducidas, como ocurre en el Bosque Protector Cerro Blanco. Nuestro objetivo fue evaluar la riqueza, abundancia y patrones de actividad de los mamíferos grandes y medianos en esta reserva. Durante siete meses, entre marzo y septiembre de 2019, establecimos 17 estaciones de fototrampeo, con cuyos datos estimamos el Índice de Abundancia Relativa (IAR) y los patrones de actividad de las especies registradas. Con un esfuerzo de muestreo total de 2937 trampa/día y 1931 eventos fotográficos independientes de mamíferos, registramos 16 especies nativos y una introducida (Canis lupus familiaris); las especies Dasyprocta punctata y Procyon cancrivorus presentaron mayor IAR; cuatro especies fueron diurnas, seis nocturnas y dos catemerales. También registramos con fototrampeo a especies amenazadas, como Alouatta palliata y Cebus aequatorialis. Recomendamos mantener este tipo de monitoreos, continuos y sistemáticos, en esta reserva, para entender los efectos de la fragmentación y de las especies introducidas sobre los mamíferos nativos.