Os fungos do filo Basidiomycota e da classe Agaricomycetes já são conhecidos desde o início da história da humanidade. Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm, variedade florida, pertence à família Pleurotaceae, e possui alta capacidade de degradar compostos a base de lignina e celulose. Devido a isso, a produção de cogumelos comestíveis apresenta uma alternativa importante para a bioconversão de resíduos agroindustriais em biomassa alimentícia. Neste sentido, o estudo objetivou produzir cogumelos comestíveis Pleurotus ostreatus variedade florida, agregando valor comercial aos resíduos agroindustriais e madeireiros obtidos na região norte do estado de Mato Grosso, além de investigar a eficiência biológica e aferir a perda de matéria orgânica dos substratos. Os substratos utilizados foram serragem, folhas de cupuaçu, e a parte aérea de mandioca, dispostos em 10 tratamentos, com 16 amostras cada, divididas em quatro repetições. Foram definidas combinações diferentes de substratos para cada tratamento, contendo um total de 600g para cada amostra. Os dados obtidos referentes à produção, foram submetidos a análise de variância contendo o coeficiente de variação, o quadrado médio do resíduo e o valor do teste F de Snedecor significativo a 1%. As variáveis avaliadas foram a produção total, produção individual, eficiência biológica e perda de matéria orgânica. O substrato composto por rama de mandioca pura ou acrescida com serragem e/ou folhas de cupuaçu foi o mais indicado para a produção do cogumelo comestível Pleurotus ostreatus variedade florida. Já a serragem pura não é recomendada para o cultivo.