UV Spectrophotometric Determination of Bioflavonoids from a Semisolid Pharmaceutical Dosage Form Containing Trichilia catigua Adr. Juss and Ptychopetalum olacoides Bentham Standardized Extract: Analytical Method Validation and Statistical Procedures

Abstract

A precise, accurate, and sensitive UV spectrophotometric method was developed and validated for routine quantification of total bioflavonoids, expressed as rutin, from a topical oil-in-water pharmaceutical emulsion containing the extract of Trichilia catigua Adr. Juss and Ptychopetalum olacoides Bentham. The method was validated experimentally, and the data were treated rigorously by statistical analysis. The following analytical parameters were assessed: linearity, specificity, intra- and interrun precision measured as relative standard deviation (RSD, %), intra- and interrun accuracy (E, %), recovery (Rec., %), limit of detection (LOD, μg/mL), and limit of quantification (LOQ, μg/mL). The UV spectrophotometric method was linear (r2 0.9995) for standard rutin over the concentration range of 5.015.0 g/mL with specificity for total bioflavonoids (expressed as rutin) at 361.0 nm with an absence of interferents from the complex matrix; RSD of ≤1.79%, intrarun (E 97.88 ±1.75 to 99.0 ± 0.33%) and interrun (E 98.38 ± 1.12 to 100.79 ± 1.30%) accuracy; Rec. 98.64 ± 0.42 to 100.74 ± 0.41%; LOD 0.20 μg/mL; and LOQ 0.30 μg/mL.

Estabilidade e estudo de penetração cutânea in vitro da rutina veiculada em uma emulsão cosmética através de um modelo de biomembrana alternativo

“…Empregou-se a espectrofotometria na região da radiação ultravioleta a 361,0 nm (espectrofotômetro Beckman DU -640, com cubeta de quartzo com caminho óptico de 1 cm), metodologia validada por Baby et al (2006a) para a quantificação do flavonóide presente na emulsão. Como substância química de referência foi utilizada a rutina padrão secundário (pureza 96,1%, NF XI, sem purificação prévia) e como solvente e branco de leitura espectrofotométrica a mistura de álcool etílico 95% e ácido acético 0,02 M na proporção de 99:1.…”

“…Para cada concentração foram calculados a média das absorbâncias, o desvio padrão, a preci-são (como desvio padrão relativo) e a exatidão, obtendo-se o estudo do intervalo das concentrações da substância química de referência e a linearidade oferecida pelo método espectrofotométrico. O gráfico foi avaliado visualmente, verificando-se se houve relação linear de resposta, e pela análise estatística pertinente (ICH Q2B, 1995;BRASIL, 2003;Baby et al, 2006a).…”

“…A especificidade foi considerada adequada quando o coeficiente angular e a intersecção com o eixo y apresentaram valores estatisticamente iguais a, respectivamente, 1,0 e 0,0 (zero), empregando-se o Teste t de Student (Feinberg, Raguènès, 1999;Baby et al, 2006a).…”

“…A estabilidade química determinada em função do teor remanescente da rutina (%) (Tabela VII) foi avaliada por meio da quantificação do referido componente ativo pelo método espectrofotométrico na região do ultravioleta a 361,0 nm previamente validado (Baby et al, 2006a).…”

Capillary Electrophoresis as Tool for Diastereomeric Separation in aTrichilia catiguaFraction

“…In previous studies, samples containing Trichilia catigua extracts were analysed by spectrophotometry, thin layer chromatography (TLC), and high performance liquid chromatography (HPLC). However, these methodologies have problems with specificity, long analysis time (more than 30 min, for HPLC analysis) and overlapping peaks, particularly with respect to diastereomers of cinchonains Ia and Ib, which hampers quantitative analysis of the extracts and semipurified fractions (Beltrame et al, ; Kletter et al, ; Baby et al, ; Beltrame et al, ; Daolio et al, ; Longhini et al, ).…”