Vergleich verschiedener Methoden zum serologischen Nachweis von α1-Foetoprotein im Serum

Abstract

Der vergleichende serologische Nachweis von -Foetoprotein im Serum zur Diagnose primärer Leberzellkarzinome wurde für folgende immunologische Methoden untersucht: Mikro-und Makro-OucHTERLONY-Technik, Überwanderungselektrophorese, Latex-Agglutination und passive Hämagglutination. Die Methodik und Fehlerquellen dieser Verfahren, insbesondere der passiven Hämagglutination im umgekehrten Verfahren (mit Bindung von Anti-o^-Foctoprotein-IgG mit bis-diazotiertem Benzidin auf frische Hammelerythrocyten) in einem Mikrotiterverfahren, und die quantitative Bestimmung in der Elcktroimmunodiffusion und in der radialen Immunodiffusion werden beschrieben. Folgende Ergebnisse wurden gefunden: 1. Bei Titrierung mit kristallinem Antigen betragen die nachweisbaren Grenzkonzentrationen in der Doppeldiffusion 10 mg/1 (MikroTechnik) bzw. 5,2 mg/1 (Makro-Technik), in der Überwanderungselektrophorese 3,6 mg/1, in der Latex-Agglutination 1,6 mg/1 und in der passiven Hämagglutination 0,03 mg/1. 2. Mit zunehmender Empfindlichkeit der Methode steigt die Anzahl positiver Ergebnisse in einem unausgewählten Krankengut bei Patienten mit primärem Leberzellkarzinom: Doppeldiffusion 58%, Latex-Agglutination 69%, Überwanderungselektrophorese 81% und passive Hämagglutination 100% positive Ergebnisse. 3. "Falsch"-positive Ergebnisse finden sich unter 142 Patienten mit anderen Karzinomen mit oder ohne Lebermetastasen und 238 Patienten mit benignen Lebererkrankungen in folgender Häufigkeit: in der Doppeldiffusion und in der Überwanderungselektrophorese in 2,1% der Patienten mit anderen Karzinomen, jedoch nicht bei benignen Lebererkrankungen, in der Latex-Agglutination in 9,9% bei Karzinomen und in 6,6% bei akuter Virushepatitis und in der passiven Hämagglutination (Titer ^ l: 4) in 28,2% bei malignen Tumoren und in 10,5% bis 23,8% bei benignen Lebererkrankungen. 4. Der Prozentsatz falsch-negativer Resultate war nur von der Empfindlichkeit der verwendeten Technik abhängig. 5. Quantitative Bestimmungen eignen sich zur Verlaufskontrolle unter zytostatischer und nach operativer Therapie. Anhand der vergleichenden Untersuchungen wird die klinische Indikation der qualitativen, semiquantitativen und quantitativen Bestimmung von o^-Foetoprotein abgegrenzt. Comparison of different methods for the serological determination of a^-foetoprotein in serumThe comparative serological determination of ^-foetoprotein in the serum for the diagnosis of primary liver cell carcinoma was carried out by the micro-and macro-OucHTERLONY-technique, electroimmunoosmopheresis, latex-agglutination and passive haemagglutination. These techniques are described in detail. Particular attention is paid to the passive haemagglutination in the reversed system, -anti-ofoetoprotein-IgG is bound with bis-diazotized benzidine on the surface of fresh sheep erythrocytes -in a microtiter technique, and to quantitative measurements in electroimmunodiffusioii and radial immunodiffusion. The results were as follows: 1. The limits of detection of oti-foetoprotein in serial dilutions, using crystalli...

Etiology of human liver cancer: Controlled prospective study in liver cirrhosis

“…Double diffusion was carried out according to Ouchterlony (1958), electroimmunoosmophoresis as described by Krassnitzki et al (1970), and latex agglutination according to Lehmann and Lehmann (1973). Statistical analysis was performed by the x 2 test.…”

Empfindlicher Nachweis von ?1-Foetoprotein im Serum durch passive H�magglutination

“…Die Bestimmung ist hinsichtlich ihrer Empfindlichkeit und ihres teehnischen Aufwandes dem Radioimmunoassay vergleichbar; der praktische Wart flit Routinebestimmlmgen wird dadurch eingesehrankt, dag nur hochtitrige, absolut monospezifische IgG-Pr~parate befriedigende Ergebnisse zeigen [16], die kommerziell nicht and experimentell nur unter grol~em Aufwand erhaltlich sind. Die Bestimmung ist hinsichtlich ihrer Empfindlichkeit und ihres teehnischen Aufwandes dem Radioimmunoassay vergleichbar; der praktische Wart flit Routinebestimmlmgen wird dadurch eingesehrankt, dag nur hochtitrige, absolut monospezifische IgG-Pr~parate befriedigende Ergebnisse zeigen [16], die kommerziell nicht and experimentell nur unter grol~em Aufwand erhaltlich sind.…”

“…I m Mittelpunkt der Bemiihungen stehen die sog. Nachdem wit in der pussiren H/imagglutination eine hochempfindliche und gut reproduzierbare Me~hode zum Nachweis yon ~l-Footoprotein im Serum entwickelt h~tten [16], untersuehten wir die Frage, ob ctI-Foetoprotein sin fiir prim~re Leberzellcarcinome spezifisches Tumorantigen ist, wie h~ufig bei anderen malignen Tumoren (mit oder ohne Lebermetastasen) und bei benignen Lebererkrankungen mit ,,falsch"-positiven Ergebnissen zu rechnen ist und ob es gelingt, einen Grenzbereieh zu ermitteln oberhalb dessen der Nachweis yon ~l-Foetoprotein pathognomonisch fiir prim~re Leberzellcarcinome ist. Die Neosynthese dieser Proteins in malignen Tumoren karm im Erwaehsenenalf~r durch Aussehwemmung in das Serum zur serologischen Diagnose dieser Tumoren dienen.…”

“…Die Antiseren wurden durch Immunisierung mit kristallinem Antigen in komplettem Freundschem Adjuvans gewonnen [13,17]. Die Antiseren wturden mit 15sliehen oder dureh Glutaraldehyd zu Immunabsorbentien polymerisierten Serumffaktionen und 1%einproteinen absorblert [16]. Die IgG-Fraktion wurde dureh AmmoniumsuI~atf~Ilung und Chromatographie fiber DEAE-Cellulose isoliert [16].…”

“…Die Antiseren wturden mit 15sliehen oder dureh Glutaraldehyd zu Immunabsorbentien polymerisierten Serumffaktionen und 1%einproteinen absorblert [16]. Die IgG-Fraktion wurde dureh AmmoniumsuI~atf~Ilung und Chromatographie fiber DEAE-Cellulose isoliert [16]. Frisehe unstabilisierte Hammelerythroeyten erhielten wir yon den Behringwerken, Marburg a. d.Lahn, Polyvinylpyrrolidon (K 30 pharm, purum, MG ca.…”