Cyclosporin A, a Peptide Metabolite from Tvichoderrna polysporum (LINK ex PERS.) Rifai, with a remarkable immunosuppressive activity. -Summary. Two antifungal metaboliies, cyclosporins A and C, were isolated from a strain of Trichoderma polysporum (LINK ex PERS.) Rzfai. Cyclosporin A, the main component, has the molecular formula C,jzHlllNnOlz as deduced by NMR. and mass spectra. Hydrolytic cleavage of cyclosporin A furnished 11 amino acids as fragments, among them an artefact of a new Cg-amino acid. The amino acid sequence was determined by Edman degradation of iso-cyclosporin A, a basic rearrangement product formed from cyclosporin A by N , O-acyl migration. In an independent investigation an X-ray analysis of the iodo derivative 10 was performed (see the following paper). On the basis of the chemical, spectroscopic and crystallographic evidencc the complete structure of cyclosporin A was elucidated as the neutral cyclic oligopeptide 1. Cyclosporin A and C show remarkable immunosuppressive and antiphlogistic activities in several pharmacological models.Aus Kulturen eines neuen Stammes der Gattung Trichoderma (fungi imperfect;) wurde ein Gemisch von Metaboliten isoliert, die durch antifungische Aktivitaten auffielen. Der neue Pilzstamm, der aus einer bei Hardanger, Norwegen, gesammelten Bodenprobe erhalten wurde, liess sich aufgrund seiner wesentlichen morphologischen Merkmale und des Wachstums auf verschiedenen Nahrboden als Trichoderma polysporum (LINK ex PERS.) Rifai bestimmenl) 2). Zur Isolierung der aktiven Stoffwechselprodukte wurden Kulturbriihen des Pilzes mit n-Butylacetat ausgeriihrt und der Extrakt durch Verteilen zwischen 90proz. Methanol und Petrolather entfettet. Chromatographie des rohen Gernisches an Kieselgel fiihrte zu einem angereicherten Wirkstoffkomplex. Weitere Chromatographien an Sephadex LH-20 und an neutralem Aluminiumoxid lieferten schliesslich zwei einheitliche Komponenten, die als Cyclosporin A und C bezekhnet wurden3). Die zwei Metaboliten scheinen strukturell nahe verwandt zu sein ; sie lassen sich mittels Dunnschichtchromatographie auf ((Polygram Sil G D gut voneinander unterscheiden. Zur Reinheitspriifung ist auch die Hochdruckfliissigkeits-Chromatographie (4Reversed-phase a-Methodik) geeignet.

The structure of cyclosporin C (2), a minor antifungal metabolite from Trichoderma polysporum (Link ex Pers.) RIFAI has been elucidated. Hydrolytic cleavage and spectroscopic evidence show that cyclosporin C is a neutral oligopeptide of 11 amino acids linked together in a 33-membered ring. Cyclosporin C (2) differs from the main metabolite cyclosporin A (1) [2] [4] only by containing L-threonine in the place of L-a-aminobutyric acid as has been shown by the conversion of 2 into 1. l3C-NMR. spectra and study of molecular models suggest that cyclosporin C (2) has the same molecular conformation as 1, which is best described as a twisted 0-pleated sheet held together in a conformationally stable form by intramolecular hydrogen bonding. 1.Einleitung. -Submerskulturen von Trichoderma polysporum (Link ex Pers.) RIFAI produzieren ein Gemisch von antifungisch aktiven Metaboliten, aus denen sich die zwei Hauptkomponenten, Cyclosporin A und C, in einheitlicher, kristallisierter Form isolieren lassen [l] [2]. Die beiden chemisch nahe verwandten Stoffe bewirken in verschiedenen pharmakologischen Modellen eine starke Immunosuppression und erweisen sich bei der Freund-Adjuvans-Arthritis als entziindungshemmend [3]. Die Struktur des Cyclosporin A (1) konnte kurzlich durch spektroskopische und kristallographische Methoden sowie durch chemischen Abbau aufgeklart werden. Der Metabolit stellt ein 33-gliedriges, neutrales Ringpeptid dar, das aus 11 z.T. N-methylierten Aminosauren aufgebaut ist [2] [4]. In der vorliegenden Arbeit berichten wir uber die Strukturermittlung von Cyclosporin C. 2.Charakterisierung von Cyclosporin C (2). -Cyclosporin C kristallisiert aus Aceton in weissen prismatischen Nadeln vom Smp. 152-1 55"; [a]: = -182" (c = 0 3 , Methanol). Der Metabolit ist gut loslich in Alkoholen, Ather, Aceton und chlorierten Kohlenwasserstoffen, hingegen nur wenig in Wasser und gesattigten Kohlenwasserstoffen. Cyclosporin C enthalt weder basische noch saure Gruppen (Titration,

No abstract

es mit Oleyl-N-methyl-taurin, wie wir fruher mitteilten, nicht selten gelingt, solche Reaktionen auszulosen, gelingt es mit 2'-0xy-8'-acylaminonaphthalin-l'-azobenzol-2,5-disulfosaurem Natrium fast ausnahmslofi, doch nur mit denjenigen Verbindungen, bei denen der Fettsaurerest mehr als 12 C-Atome enthiilt. Sehr haufig, aber nicht immer, wird durch die Vorausgabe eines Vertreters aus dieser Substanzserie volle Reaktionsunfahigkeit des Uterus auf die nachfolgende Gabe einer andern Substanz aus der gleichen Serie erzielt. Gelegentlich, aber nicht hauiig, haben such Substanzen mit kurzerer Fettsaure, die selber keine Reaktion auslosen, neutralisiert. Die Auslosung einer Reaktion mit den von uns verwendeten Substanzen bewirkt keine Aufhebung anaphylaktischer Uberempfindlichkeit, und umgekehrt konnen mit unseren Substanzen Reaktionen ausgelost werden, nachdem vorher anaphylaktische Kontraktionen des Muskels ausgelost worden sind. Anaphylaxieahnliche Reaktionen, wie sie hier mit chemisch bekannten SubfitanZen ausgelost wurden, sind von Kellaway fur Schlangengifte beschrieben. Auf die Analogie der hier beschriebenen Reaktionen mit der sog. Taehyphylaxie haben wir hingewiesen. Es handelt sich hier um ein noch ungeklartes Phanomen, dem unserer Ansicht nach allgemeines Interesse zukommt.

No abstract