The production of KPC (Klebsiella pneumoniae carbapenemase) is the major mechanism of resistance to carbapenem agents in enterobacterias. In this context, forty KPC-producing Enterobacter spp. clinical isolates were studied. It was evaluated the activity of antimicrobial agents: polymyxin B, tigecycline, ertapenem, imipenem and meropenem, and was performed a comparison of the methodologies used to determine the susceptibility: broth microdilution, Etest® (bioMérieux), Vitek 2® automated system (bioMérieux) and disc diffusion. It was calculated the minimum inhibitory concentration (MIC) for each antimicrobial and polymyxin B showed the lowest concentrations for broth microdilution. Errors also were calculated among the techniques, tigecycline and ertapenem were the antibiotics with the largest and the lower number of discrepancies, respectively. Moreover, Vitek 2® automated system was the method most similar compared to the broth microdilution. Therefore, is important to evaluate the performance of new methods in comparison to the reference method, broth microdilution.

Water-borne diseases like diarrheagenic Escherichia coli (DEC)-induced gastroenteritis are major public health problems in developing countries. In this study, the microbiological quality of water from mines and shallow wells was analyzed for human consumption. Genotypic and phenotypic characterization of DEC strains was performed. A total of 210 water samples was analyzed, of which 153 (72.9%) contained total coliforms and 96 (45.7%) E. coli. Of the E. coli isolates, 27 (28.1%) contained DEC genes. The DEC isolates included 48.1% Shiga toxin-producing E. coli (STEC), 29.6% enteroaggregative E. coli (EAEC), 14.9% enteropathogenic E. coli (EPEC), 3.7% enterotoxigenic E. coli (ETEC), and 3.7% enteroinvasive E. coli (EIEC). All the STECs had cytotoxic effects on Vero cells and 14.8% of the DEC isolates were resistant to at least one of the antibiotics tested. All DEC formed biofilms and 92.6% adhered to HEp-2 cells with a prevalence of aggregative adhesion (74%). We identified 25 different serotypes. One EPEC isolate was serotype O44037:H7, reported for the first time in Brazil. Phylogenetically, 63% of the strains belonged to group B1. The analyzed waters were potential reservoirs for DEC and could act as a source for infection of humans. Preventive measures are needed to avoid such contamination.

ResumoIntrodução: As doenças veiculadas pela água são principalmente causadas por patógenos entéricos, sendo o patotipo Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) de grande importância em países em desenvolvimento. Objetivo: Detectar a presença de genes de virulência relacionados à ETEC em cepas de E. coli isoladas de água para consumo humano. Metodologia: 295 cepas de E. coli obtidas de água de 27 municípios do norte do Estado do Paraná, Brasil, entre fevereiro e dezembro de 2005, foram testadas quanto a presença de genes que codificam para as enterotoxinas LT-I (lt-I), ST-a (st-a) e ST-b (st-b) e para os fatores de colonização CFA/I (cfa/I), CFA/II (cfa/ II), K88 (faeG) e K99 (fanC) através da técnica da PCR. Resultados: Das 295 cepas de E. coli estudadas, 36 (12,2%) apresentaram o gene lt-I, uma (0,34%) o gene st-a e três (1,02%) o st-b. Quanto aos fatores de colonização, três cepas (1,02%) foram positivas para o gene faeG, quatro (1,36%) para cfa/I, duas (0,68%) para cfa/II e nenhuma apresentou o gene fanC. Uma cepa (0,34%) foi positiva simultaneamente para os genes lt-I e st-b e outra (0,34%) para os genes lt-I e faeG. Conclusão: Logo, cinquenta e uma (17,29%) cepas apresentaram, pelo menos, um gene que codifica enterotoxina e/ou fator de colonização relacionado à ETEC. Sendo assim, o cuidado com a qualidade microbiológica da água para consumo humano é fundamental, evitando que a mesma torne-se veículo de transmissão de bactérias potencialmente patogênicas, como ETEC. Palavras-chave: ETEC. Água Potável. Fatores de Virulência. LT-I (lt-I), ST-a (st-a) and ST-b (st-b) Abstract

O presente estudo teve como objetivo avaliar a evolução da resistência a antimicrobianos em isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae, no período de 2000 a 2011, no Hospital Universitário da Universidade Estadual de Londrina (HU-UEL). Foi realizada uma análise retrospectiva de 2.318 testes de sensibilidade aos antimicrobianos de K. pneumoniae, a partir de um banco de dados do setor de Microbiologia do Laboratório Clínico do HU. No período de 2000 a 2009, o principal mecanismo de resistência aos antimicrobianos ?-lactâmicos observado foi a produção de ?-lactamases do tipo ESBL (?-lactamase de espectro ampliado), que pode ser verificado pelo aumento da resistência de K. pneumoniae às cefalosporinas de 3ª geração e ao cefepime. No entanto, a partir de 2009 apareceram as primeiras cepas de K. pneumoniae produtoras de carbapenemase, comprometendo a eficácia dos carbapenêmicos. Os índices de resistência ao ertapenem variaram de 16%, em 2005, para 40%, em 2011. Outra classe de antimicrobianos comprometida foi a das fluoroquinolonas; para ciprofloxacina, os índices de resistência variaram de 13% a 62%, em 2001 e 2011, respectivamente. Os aminoglicosídeos tiveram oscilações de resistência durante o período estudado, chegando, em 2011, a valores de 56% e 30% para gentamicina e amicacina, respectivamente. Enquanto isso, sulfametoxazol/trimetoprim e piperacilina/tazobactam alcançaram cerca de 60%, nesse mesmo período. O aumento de resistência em K. pneumoniae neste hospital evidencia a necessidade de adequação do tratamento de infecções por este agente e de adoção de medidas apropriadas que visem ao controle de infecções, bem como ao uso adequado dessas drogas.

Escherichia coli diarreiogênica (DEC) é um importante agente de infecções gastrointestinais, transmitidas pela água. O trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica e físico-química de 58 amostras de água subterrânea in natura para consumo de um assentamento rural e caracterizar os isolados de E. coli, genotipicamente dentro dos patotipos de DEC, pela técnica da PCR, e fenotipicamente. Todas as amostras apresentaram contaminação por coliformes totais e 36 (62,1%) por E. coli. Em células HEp-2, dos 170 isolados de E. coli, 106 (62,36%) apresentaram AA, 15 (8,82%) AD, 17 (10%) adesão não caracterizado e 32 (18,82%) foram não aderentes. Quanto à formação de biofilme, 126 (74,12%) cepas são formadoras, e 44 (25,88%) não formaram biofilme. Foram identificadas DEC em 6,89% das amostras de água: três (5,17%) ETEC e uma (1,72%) EAEC. EAEC apresentou AA e as três cepas de ETEC apresentaram: AD, AA e não definida. Todas as DEC foram formadoras de biofilme. Dois isolados de ETEC apresentaram resistência a ampicilina e tetraciclina, uma ETEC, a aminoglicosídeos, e EAEC foi sensível a todos os antibióticos testados. As ETEC foram classificadas no filogrupo B1 e a EAEC no E. Os sorotipos encontrados foram: O24:H21, OR:H21, O17:H46 e O6:H12. Todas as amostras estavam dentro dos parâmetros normais de flúor e 13 (22,4%) apresentaram resultados acima do padrão permitido de turbidez. A presença de E. coli e DEC nas amostras de água indica a necessidade de adoção de medidas que evitem a contaminação da água fornecida à população, evitando assim, a transmissão de doenças.