The catfishes Brachyplatystoma filamentosum (Kumakuma), Brachyplatystoma vaillantii (Laulao catfish), and Brachyplatystoma rousseauxii (gilded catfish) are important fishery resources in Brazil, where they are sold both fresh and in the form of fillets or steaks. These species have morphological similarities, thus, they can be easily misidentified or substituted, especially after processed. Therefore, accurate, sensitive, and reliable methods are needed for the identification of these species to avoid commercial fraud. In the present study, we develop two multiplex PCR assays for the identification of the three catfish species. Each multiplex protocol combined three species-specific forward primers and a universal reverse primer to produce banding patterns able to discriminate the target species unequivocally. The length of the cytochrome C oxidase subunit I (COI) fragments was approximately 254 bp for B. rousseauxii, 405 bp for B. vaillantii, and 466 bp for B. filamentosum, while the control region (CR) assay produced fragments of approximately 290 bp for B. filamentosum, 451 bp for B. vaillantii, and 580 bp for B. rousseauxii. The protocols were sensitive enough to detect the target species at a DNA concentration of 1 ng/µL, with the exception of the CR of B. vaillantii, in which the fragment was only detectable at 10 ng/µL. Therefore, the multiplex assays developed in the present study were sensitive, accurate, efficient, rapid, and cost-effective for the unequivocal identification of the target species of Brachyplatystoma. They can be utilized by fish processing industries to certify their products, or by government agencies to authenticate products and prevent fraudulent commercial substitutions.

No Norte do Brasil, as pescadas branca (Plagioscion squamosissimus) e gó (Macrodon ancylodon) são peixes de importância comercial, vendidos in natura e como filés ou postas congeladas. O processamento proporciona praticidade, qualidade e valor agregado ao pescado, no entanto, facilita substituições devido à remoção de caracteres diagnósticos. Portanto, este estudo teve como objetivos avaliar a ocorrência de substituição em peixes processados rotulados como pescada-branca e pescada-gó, comercializados na região metropolitana de Belém e averiguar se estas são economicamente motivadas. Foram sequenciados 618 pb da região barcoding da COI de 108 filés e 95 produtos rotulados como pescada-branca e pescada-gó, respectivamente. Todos foram identificados em nível específico, através de comparação com sequências do GenBank e BOLD. Apenas 13,89% dos filés rotulados como pescada-branca pertenciam à P. squamosissimus, enquanto 86,11% foram substituídos por M. ancylodon (38,89%), Plagioscion auratus (21,30%), Cynoscion virescens (9,26%), Nebris microps (12,04%), Cynoscion acoupa (3,70%) e Cynoscion microlepidotus (0,93%). Por outro lado, 94,74% dos produtos rotulados como pescada-gó pertenciam à M. ancylodon, enquanto 5,26% foram substituídos por C. virescens (2,11%), Cynoscion guatucupa (2,11%) e C. microlepidotus (1,05%). O teste do Qui-quadrado (χ2 = 132; Gl = 1; p < 0,01) confirma que a taxa de substituição é significativamente maior para a pescada-branca, a espécie de maior valor comercial. Adicionalmente, as substituições geralmente incluem espécies de baixo valor comercial. Portanto, conclui-se que as substituições são economicamente motivadas e podem ser caracterizadas como fraude comercial, onde as empresas têm como principal objetivo a obtenção de lucro em detrimento do consumidor.