Development and optimization of the amperometric biosensor for pyruvate determination. Methods. Immobilized pyruvate oxidase was used as a biorecognition element of the biosensor, a platinum disc electrode, as an electrochemical transducer. Results. Different variants of immobilization of pyruvate oxidase were tested and the optimal one was chosen for the creation of a biorecognition element of the biosensor. Optimal concentrations of cofactors for the best performance of the pyruvate oxidase-based biosensor were selected. The developed biosensor demonstrated a high sensitivity to pyruvate and wide linear range. High selectivity of the proposed biosensor towards electrically active substances and other substrates present in real samples was shown. The biosensor is characterized by high signal reproducibility and operational stability over two weeks. Conclusions. The highly selective amperometric biosensor for determination of pyruvate in biological samples has been developed. Its analytical characteristics were studied. The biosensor can be further used for the pyruvate analysis in blood serum. K e y w o r d s: pyruvate, pyruvate oxidase, amperometric biosensor.

Development of an amperometric biosensor for measuring choline concentration in water samples. Methods. A bioselective element of the biosensor was created using choline oxidase which was covalently immobilized by glutaraldehyde crosslinking with bovine serum albumin on the surface of an amperometric platinum disk electrode. Results. The conditions of the bioselective element formation (the enzyme and glutaraldehyde concentrations, time of procedure) were optimized. The biosensor developed was characterized by good response reproducibility over hours of continuous operation. The linear range of substrate determination ranged from 10 µM to 1000 µM, a limit of choline detection-1-3 µM, the biosensor sensitivity was 25-30 nA/mM. An effect of interfering substances was significantly reduced by the application of an additional semipermeable poly-m-phenylenediamine (PPD) membrane. Conclusions. The developed biosensor is wellsuited for choline determination in water samples. K e y w o r d s: biosensor, amperometric transducer, immobilized enzyme, choline oxidase, choline.

Анотація. В роботі описано розробку біосенсорної системи, що складається з двох моно-біосенсорів на основі піруватоксидази та лактатоксидази для визначення пірувату та лактату, відповідно. Для іммобілізації ензимів у складі біоселективної мембрани було використано ме-тод захоплення в полімер PVA-SbQ на поверхні амперометричного перетворювача. Як пере-творювачі виступали платинові дискові електроди. В роботі було підібрано єдині умови ви-готовлення та функціонування монобіосенсорів для поєднання їх у біосенсорну систему. Було досліджено оптимальні умови іммобілізації ензимів та параметри буферного розчину для одно-часної роботи біосенсорів, зокрема рН, буферну ємність та іонну силу. Перевірено перехрес-ний вплив субстратів та кофакторів на роботу ензимів. Біосенсорна система характеризувалась гарною операційною стабільністю та відтворюваністю відгуків на піруват та лактат. Отримані аналітичні характеристики біосенсорної системи свідчать про можливість її використання для аналізу лактату та пірувату в реальних біологічних рідинах.Ключові слова: лактат, піруват, біосенсорна система, іммобілізовані ензими, лактатоксида-за, піруватоксидаза

Розроблено глутаматний біосенсор та адаптовано його для аналізу швидкості накопичення глутамату ізольованими нервовими терміналями головного мозку щурів. Для ство