Several materials are commercially available as substitutes for skin. However, new strategies are needed to improve the treatment of skin wounds. In this study, we developed and characterized a new device consisting of poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) and collagen associated with mesenchymal stem cells derived from human adipose tissue. To develop the bilaminar device, we initially obtained a membrane of PLGA by dissolving the copolymer in chloroform and then produced a collagen type I scaffold by freeze-drying. The materials were characterized physically by gel permeation chromatography, scanning electron microscopy, and mass loss. Biological activity was assessed by cell proliferation assay. A preliminary study in vivo was performed with a pig model in which tissue regeneration was assessed macroscopically and histologically, the commercial device Integra being used as a control. The PLGA/collagen bilaminar material was porous, hydrolytically degradable, and compatible with skin growth. The polymer complex allowed cell adhesion and proliferation, making it a potentially useful cell carrier. In addition, the transparency of the material allowed monitoring of the lesion when the dressings were changed. Xenogeneic mesenchymal cells cultured on the device (PLGA/collagen/ASC) showed a reduced granulomatous reaction to bovine collagen, down-regulation of α-SMA, enhancement in the number of neoformed blood vessels, and collagen organization as compared with normal skin; the device was superior to other materials tested (PLGA/collagen and Integra) in its ability to stimulate the formation of new cutaneous tissue.

requisito para a obtenção do título de Mestre em Engenharia Mecânica. v Agradecimentos A minha família por ter me ensinado a importância dos estudos e dedicação ao trabalho, pelos sábios conselhos e pelo companheirismo. A Profa. Dra. Eliana Aparecida de Rezende Duek pela orientação, confiança e principalmente pelos ensinamentos, sempre com muito profissionalismo, mostrando o caminho a ser seguido com clareza e objetividade. A Dra. Adriana Motta pelo auxílio interminável na realização de minhas análises de caracterização, e pelas claras e sugestivas correções de meu trabalho.A Silvia Mara de Melo Cattani pela confecção das lâminas para a histologia. E a Profa.Dra. Maria Lourdes Peris Barbo, pela análise de minhas lâminas histológicas.A Claudenete Leal, pela receptividade e grande ajuda na realização dos ensaios mecânicos e de microscopia eletrônica.A companheira Juliana Almeida por toda a sua ajuda, principalmente nas horas terríveis e confusas. E a amiga Kelly Martins pela ajuda na elaboração de minhas membranas poliméricas e pelos momentos de desabafos compartilhados. Aos amigos AndréDutra Messias e Vinicius A. M. R. Melo pelos ensinamentos, paciência e colaboração durante toda a jornada na utilização dos equipamentos e técnicas de cultivo celular. Além das caronas durante o desenvolvimento prático do estudo. E ao amigo Vitor de Miranda Fedrizzi pelo incentivo e apoio durante todo o processo. A todos os pesquisadores, mestrandos e doutorandos, do Laboratório de Biomateriais pelo apoio e trabalho em equipe. Cabe ainda, o sincero reconhecimento às numerosas pessoas que sugeriram, refletiram, esclareceram e, de alguma forma colaboraram na produção desse trabalho. A CAPES pelo apoio financeiro vi "A mente que se abre a uma nova ideia jamais voltará ao seu tamanho original." Albert Einstein vii RESUMOUm dos desafios da Engenharia Tecidual é o de promover um melhor funcionamento de órgãos e tecidos danificados por doenças ou traumas. Com o objetivo de desenvolver um dispositivo bifásico para futura regeneração dérmica e aplicação na Engenharia Tecidual e Medicina Regenerativa, cultivou-se células fibroblásticas da linhagem VERO sobre uma matriz dérmica suína acelular associada a um polímero biorreabsorvível, poli (L-ácido láctico) (PLLA), com adição de um plastificante, o trietil citrato de sódio (TCS). Para a realização da pesquisa, membranas PLLA-TCS e PLLA puro foram preparadas e caracterizadas através de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Ensaio Dinâmico Mecânico pelo Módulo de Tração, Espectroscopia na região do Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), Ressonância Magnética Nuclear (RMN 13 C e 1 H), Ângulo de Contato e Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC). Os resultados mostraram que as membranas de PLLA-TCS, tornaram-se porosas e mais hidrofílicas em relação as membranas de PLLA puro, o que aumentou sua interação com as células fibroblásticas. Após a associação das membranas de PLLA-TCS à derme suína, as amostras foram analisadas por meio de Técnicas Histológicas e Microscopia Confocal pa...