The large cytoplasmic domain of rabbit sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase was overexpressed in Escherichia coli as a 48 kDa fusion protein, designated p48, containing an N-terminal hexa-His tag. Purification conditions were optimized, thus conferring long-term stability to p48. Circular dichroism spectroscopy and the pattern of limited trypsinolysis confirmed the proper folding of the domain. p48 retained 0.5 +/- 0.1 mol of high affinity 2',3'-O-(2,4,6-trinitrophenyl)adenosine-5'-triphosphate (TNP-ATP) binding sites per mol of polypeptide chain with an apparent dissociation constant of about 8 microM. Size-exclusion FPLC using protein concentrations in the range 0.03 5 mg/ml showed that p48 was essentially monodisperse with apparent molecular mass and Stokes radius (Rs) values compatible with a dimer (100 kDa and 40 A, respectively). Analysis of p48 by small-angle X-ray scattering provided an independent second proof for a dimeric p48 particle with a radius of gyration (Rg) of 39 A, suggesting that the dimer was not spherical (Rs/Rg = 1.026). When digested by proteinase K, p48 was converted to a 30 kDa fragment, designated p30, which was very resistant to further proteolysis. p30 retained high affinity TNP-ATP binding (Kd = 8 microM) and eluted as a monomer (35 kDa) in size-exclusion FPLC. As opposed to p48, the p30 fragment did not react with monoclonal antibody A52 [Clarke et al., J. Biol. Chem. 264 (1989) 11246-11251] which recognizes region E657-R672 located upstream of the hinge domain of the Ca2+-ATPase. These results indicate a requirement of the hinge domain (670-728) region for self-association of the p48 large hydrophilic domain as a dimer. We propose that this behavior points to a possible role of the hinge domain in dimerization of sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase in the native membrane.

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Este segundo volume da obra Imaginários Tecnocientíficos objetiva compreender como as imagens provenientes das ciências e das tecnologias se organizam e qual vínculo estabelecem com as atividades do pensamento. Neste livro, os organizadores prosseguem na investigação dos imaginários tecnocientíficos, buscando suas relações com as narrativas míticas e com a iconosfera proveniente de outras áreas do saber, como a literatura e as artes. Os 11 capítulos deste volume tratam dos aspectos ficcionais da ciência. Em conjunto, os 22 trabalhos que compõem os dois volumes exploram desde uma visão crítica da tecnologia até questões transversais, que passam pelas novas tecnologias informacionais, inteligências artificiais, uso de máquinas cognitivas, de algoritmos, etc.

Dados demográficos tem mostrado aumento na participação de negros no ensino superior. Sabe-se que esse aumento não é equitativo para todas as áreas de conhecimento nem para todos os gêneros. Todavia, no tocante à pós-graduação, não há estudos conclusivos sobre a participação de mulheres negras no corpo docente de programas de pós-graduação em Ciência da Computação. Nesse sentido, este artigo apresenta uma proposta de pesquisa em andamento que pretende identificar e analisar, em um estudo piloto, a presença e a atuação de mulheres negras como professoras em programas de pós-graduação em Ciência da Computação do Brasil.

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