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ZUSAMMENFASSUNG:Es wird ein neues Verfahren zur Gewinnung von Oligonucleotid-Fragmenten beschrieben, die zum Aufbau von Polynucleotiden eingesetzt werden konnen.Es beruht auf der chemischen Cooligokondensation von NucleinGurebausteinen der allgemeinen Formel X-A, p B und p C-Y. Dabei sind A, B und C beliebige Nucleoside. X und Y sind Schutzgruppen, die der geschiitzten Oligonucleotidkette eine bestimmte Affinitat verleihen (sog. ,,Affinitats-Schutzgruppen"). Es werden Beispiele besprochen, bei denen eine 3'-terminale Uridineinheit als Affinitatsschutzgruppe dient. So wurde Thymidylsaure mit Derivaten der Ribouridylsaure cooligokondensiert, die beiden Typen von Produkten -(pdT), und (pdT),-rU -durch Chromatografie auf Boratsaulen getrennt und anschlieBend die einzelnen Sequenzen durch DEAE-Cellulose oder Papierchromatographie in reiner Form gewonnen. Die Cooligokondensation von Thymidylsaure rnit 02', O3'-(Diacetylribouridyl-5',3'-yl)-N-(acetyl)desoxycytidin-5'-phosphat ergab Sequenzen (p dT),-dC-rU.Weiterhin wurde die Dreikomponenten-Cooligokondensation *I 5. Mitteilung iiber ,,Synthesen rnit Nucleinsaure-Bausteinen". 4.

Alle bekannten Methoden zum Aufbau von Oligonucleotiden spezifischer Sequenz gehen im Prinzip davon aus, da13 an ein Monomeres oder an das Ende einer Oligomerenkette Schritt fur Schritt weitere Bausteine angelagert werden. Dabei ergeben sich bei jeder Verlangerung der Kette um eine Einheit drei verschiedene Probleme: In beiden Komponenten, die zusammengefugt werden, mussen alle reaktiven Funktionen bis auf je eine geschutzt werden. Eine der Komponenten wird dann aktiviert, um eine Kondensation herbeizufuhren. Anschlieoend mu13 das Ende der verlangerten Kette wieder von der Schutzgruppe befreit werden, um einen neuen Anbau zu ermoglichen l). Da alle diese Reaktionsschritte vonzumeist chromatografischen -Trennoperationen begleitet sind, ist die chemische Synthese von Oligo-und Polynucleotiden auljerordentlich zeit-und arbeitsaufwendig. Durch die Entwicklung von Tragersynthesen '9 2, oder die Anwendung sonstiger Schutzgruppen, die gleichzeitig als ,,Trennhilfen" wirken '), konnte man die Trennoperationen erleichtern.

Alle bekannten Methoden zum Aufbau von Oligonucleotiden spezifischer Sequenz gehen im Prinzip davon aus, da13 an ein Monomeres oder an das Ende einer Oligomerenkette Schritt fur Schritt weitere Bausteine angelagert werden. Dabei ergeben sich bei jeder Verlangerung der Kette um eine Einheit drei verschiedene Probleme: In beiden Komponenten, die zusammengefugt werden, mussen alle reaktiven Funktionen bis auf je eine geschutzt werden. Eine der Komponenten wird dann aktiviert, um eine Kondensation herbeizufuhren. Anschlieoend mu13 das Ende der verlangerten Kette wieder von der Schutzgruppe befreit werden, um einen neuen Anbau zu ermoglichen l). Da alle diese Reaktionsschritte vonzumeist chromatografischen -Trennoperationen begleitet sind, ist die chemische Synthese von Oligo-und Polynucleotiden auljerordentlich zeit-und arbeitsaufwendig. Durch die Entwicklung von Tragersynthesen '9 2, oder die Anwendung sonstiger Schutzgruppen, die gleichzeitig als ,,Trennhilfen" wirken '), konnte man die Trennoperationen erleichtern.

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