Two different ELISAs were routinely performed in our laboratory to detect bovine trypanosomosis and anaplasmosis. The ELISA test for trypanosomosis involved the adsorption of a soluble fraction of parasites as the antigen; and, the ELISA for anaplasmosis was performed with a purified recombinant protein MSP5r adsorbed to the plate. With the purpose of assessing the merit of ABTS and TMB, we compared the absorbance obtained from positive and negative control sera from both assays. The results obtained, suggest that TMB is more adequate for recombinant antigens and that ABTS is preferred when partially purified antigenic extracts are used in the ELISA test.

La leucemia mieloide crónica (LMC) representa el 2 %-3 % de las leucemias pediátricas, está asociada a una enfermedad más agresiva y tiene como característica la presencia del transcrito de fusión BCR/ABL1. A través de la RT-PCR, una técnica de biología molecular altamente sensible y específica, se detecta la translocación cromosómica más frecuente en pacientes pediátricos con LMC: t(9;22)(q34;q11). La especificidad y eficacia de la RT-PCR depende en gran medida de los cebadores utilizados en la reacción y para ello la validación de estos es necesaria. La misma permite verificar la detección de la secuencia diana, así como la eficiencia y posible uso de los cebadores para el diagnóstico. La Unidad de Diagnóstico Molecular de la Fundación Jacinto Convit (UDM-FJC) se propuso validar cebadores específicos para la detección de la translocación más común en pacientes pediátricos con LMC mediante RT-PCR. Los productos obtenidos de las variantes en estudio fueron secuenciados mediante el método de Sangre y analizados a través de las herramientas bioinformáticas PCR virtual, MultiAlin y BLASTN. Como resultado se obtuvo altos porcentajes de similaridad y cobertura de las variantes e1a2 y b3a2 para BCR/ABL1p190 y BCR/ABL1p210, respectivamente. Adicionalmente las secuencias obtenidas fueron publicadas en GenBank. Esta validación demuestra que los cebadores empleados en la UDM-FJC son adecuados para el diagnóstico molecular en pacientes pediátricos con LMC, debido a que presentan una buena especificidad y eficiencia en la detección del transcrito de fusión más frecuente en este tipo de leucemia.

A nivel mundial más de 1.8 millones de niños están infectados con el Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH). La determinación mediante técnicas moleculares de los genes principales del VIH tipo 1 (VIH-1), principal causante de la pandemia del SIDA, aporta información de valor diagnóstico en pacientes pediátricos, primordialmente los nacidos de madres seropositivas. A través de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) anidada, una técnica de biología molecular altamente sensible y específica, la Unidad de Diagnóstico Molecular de la Fundación Jacinto Convit (UDM-FJC) detecta dos de los genes principales del VIH-1: env y gag. La especificidad y eficacia de la PCR anidada depende en gran medida de los cebadores utilizados en la reacción y para ello la validación de estos es necesaria. Esta permite verificar la eficiencia y posible uso de los cebadores para el diagnóstico. La UDM-FJC se propuso validar los cebadores específicos para la detección de env y gag en pacientes pediátricos con sospecha de la enfermedad. Los productos amplificados de los genes fueron secuenciados mediante el método de Sanger y analizados a través de las herramientas bioinformáticas PCR virtual, MultiAlin y BLASTN, observando altos porcentajes de similaridad y cobertura. Adicionalmente, las secuencias obtenidas fueron publicadas en GenBank. Esta validación demuestra que los cebadores empleados en la Unidad son adecuados para el diagnóstico molecular del VIH- 1 en pacientes pediátricos y pueden ser referencia adicional para otros laboratorios, debido a su buena especificidad y eficiencia para detectar los principales genes del virus.