Devido ao crescente incentivo à prática do aleitamento materno por parte tanto do Ministério da Saúde quanto dos profissionais da área, faz-se necessário adequada análise microbiológica do leite fornecido pelo Lactário. Coletaram-se 80 amostras de Leite Humano (LH) do Lactário do Hospital de Clínicas (HC) da Universidade Federal do Triângulo Mineiro (UFTM). As amostras foram coletadas de forma aleatória e tiveram o volume de, aproximadamente, um mL cada. A análise microbiológica foi realizada com semeadura inicial em Agar sangue e Agar MacConkey e posterior identificação com provas bioquímicas. Os resultados indicaram 7,5% de casos de amostras de LH contaminadas. O estudo retrospectivo dos prontuários dos recém-nascidos que utilizaram essas amostras com evidência de contaminação demonstrou, nesses, ausência de infecções neonatais no decorrer de uma semana após a ingestão do leite provido pelo Lactário do HC/UFTM. Embora se saiba que o Lactário do HC/UFTM segue protocolos rígidos quanto à manipulação do LH, a contaminação de algumas amostras traduz a necessidade de maior controle e cuidado higiênico sanitário por parte de manipuladores, visando, assim, evitar possíveis infecções neonatais que podem ocorrer devido à presença desses microrganismos.