Staphylococcus simulans lysostaphin is an endopeptidase lysing staphylococcus cell walls by cleaving pentaglycine cross-bridges in their peptidoglycan. A synthetic gene encoding S. simulans lysostaphin was cloned in Escherichia coli cells, and producer strains were designed. The level of produced biologically active lysostaphin comprised 6-30% of total E. coli cell protein (depending on E. coli M15 or BL21 producer) under batch cultivation conditions. New methods were developed for purification of lysostaphin without affinity domains and for testing its enzymatic activity. As judged by PAGE, the purified recombinant lysostaphin is of >97% purity. The produced lysostaphin lysed cells of Staphylococcus aureus and Staphylococcus haemolyticus clinical isolates. In vitro activity and general biochemical properties of purified recombinant lysostaphin produced by M15 or BL21 E. coli strains were identical to those of recombinant lysostaphin supplied by Sigma-Aldrich (USA) and used as reference in other known studies. The prepared recombinant lysostaphin represents a potential product for development of enzymatic preparation for medicine and veterinary due to the simple purification scheme enabling production of the enzyme of high purity and antistaphylococcal activity.

No abstract

No abstract

РезюмеВажнейшим прогностическим фактором при муковисцидозе (МВ) является характер респираторной инфекции. В России разнообра зию микробного пейзажа нижних дыхательных путей у больных МВ посвящены единичные работы на ограниченных выборках боль ных. Общий анализ на большой группе пациентов в рамках единого регистра ранее не проводился. Цель. Выявление особенностей хро нической инфекции респираторного тракта у больных МВ в России по данным национального Регистра. Материалы и методы. Сведе ния о пациентах (n = 2 131: живых -2 092; умерших -39) из 74 регионов России, состоящих в национальном Регистре больных МВ (2014). Медиана возраста пациентов -10,2 (15,2) года, доля взрослых (не моложе 18 лет) -29,2 %. Проанализирована часть Регистра, посвященная микробиологическим показателям: наличие хронической инфекции, вызванной бактериями Staphylococcus aureus, Pseudo monas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia соmplex, нетуберкулезными микобактериями и непсевдомонадной гра мотрицательной флорой (НПГОФ) (включая Achromobacter spp.). Также оценена частота интермиттирующего высева P. aeruginosa. Результаты. У 18,0 % больных ни один из исследуемых микроорганизмов не обнаружен. Частота инфицирования дыхательных путей различной флорой представлена в порядке убывания: S. aureus -54,5 %, P. aeruginosa (хроническое инфицирование) -32,1 %, P. aerug inosa (интермиттирующий высев) -14,1 %, B. cepacia complex -7,3 %, Achromobacter spp. -3,5 %, S. maltophilia -3,3 %, нетуберкулезные

исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва 2 ФГБНУ «Медико-генетический научный центр» РАН, Москва 3 ФГБОУ ВО "РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России, Москва Эпидемиологический надзор за хроническими инфекциями легких, вызванными бактериями Burkholderia cepacia complex, бактериями рода Achromobacter, Pseudomonas аeruginosa и метициллинрезистентным Staphylococcus aureus, у больных муковисцидозом Резюме Актуальность. Отсутствие системы эпидемиологического надзора за хронической инфекцией легких (ХИЛ) у больных муковисцидозом (МВ) сделало бесконтрольным распространение возбудителей ХИЛ среди больных МВ в стационарах, о чем свидетельствовали многочисленные случаи инфицирования больных МВ, лечившихся в различных клиниках России. Цель исследования-определить направления эпидемиологического надзора (ЭН) за ХИЛ у больных муковисцидозом и профилактических мероприятий, необходимых для противодействия перекрестному инфицированию больных МВ и распространению доминирующих возбудителей хронической инфекции легких в стационаре. Материалы и методы. В статье проанализированы данные, полученные нами в результате исследований эпидемиологических и микробиологических особенностей ХИЛ у больных муковисцидозом. Использовали эпидемиологические, бактериологические и молекулярно-генетические (ПЦР, мультилокусное секвенирование, секвенирование полного генома) методы исследования. Результаты и обсуждение. Основываясь на результатах исследований эпидемиологических и микробиологических особенностей инфекций, вызванных вышеуказанными возбудителями, были определены направления ЭН и профилактических мероприятий при МВ. Обоснованы задачи информационно-аналитического блока, включающего мониторинг заболеваемости и микробиологический мониторинг. Установлено, что в рамках микробиологического мониторинга необходимо проводить бактериологическое исследование биоматериала из дыхательных путей больных МВ не реже чем 1 раз в квартал, а также при каждом амбулаторном посещении и госпитализации. Показана необходимость: исследования фенотипических свойств возбудителей, способствующих длительной персистенции в организме больного МВ; определения и мониторинга антибиотикочувствительности микроорганизмов, выделенных от больного в динамике; исследования гипермутабельности. Одной из основных задач мониторинга является молекулярно-генетический анализ возбудителей методом ПЦР с целью внутривидовой идентификации, типирования возбудителей и выявления эпидемических маркеров и клонов (в том числе и международных), идентификации генов детерминант антибиотикорезистентности. Выводы. Внедрение ЭН за хронической инфекцией легких позволит улучшить качество этиологической диагностики, своевременно выявлять источники инфекций и предупреждать распространение возбудителей ХИЛ среди больных МВ как в стационарах, так и во вне госпитальных условий, а также оптимизировать тактику антимикробной терапии ХИЛ. Основными направлениями предупреждения распространения возбудителей ХИЛ должны быть разделение потоков...