Staphylococcus simulans lysostaphin is an endopeptidase lysing staphylococcus cell walls by cleaving pentaglycine cross-bridges in their peptidoglycan. A synthetic gene encoding S. simulans lysostaphin was cloned in Escherichia coli cells, and producer strains were designed. The level of produced biologically active lysostaphin comprised 6-30% of total E. coli cell protein (depending on E. coli M15 or BL21 producer) under batch cultivation conditions. New methods were developed for purification of lysostaphin without affinity domains and for testing its enzymatic activity. As judged by PAGE, the purified recombinant lysostaphin is of >97% purity. The produced lysostaphin lysed cells of Staphylococcus aureus and Staphylococcus haemolyticus clinical isolates. In vitro activity and general biochemical properties of purified recombinant lysostaphin produced by M15 or BL21 E. coli strains were identical to those of recombinant lysostaphin supplied by Sigma-Aldrich (USA) and used as reference in other known studies. The prepared recombinant lysostaphin represents a potential product for development of enzymatic preparation for medicine and veterinary due to the simple purification scheme enabling production of the enzyme of high purity and antistaphylococcal activity.

No abstract

исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва 2 ФГБНУ «Медико-генетический научный центр» РАН, Москва 3 ФГБОУ ВО "РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России, Москва Эпидемиологический надзор за хроническими инфекциями легких, вызванными бактериями Burkholderia cepacia complex, бактериями рода Achromobacter, Pseudomonas аeruginosa и метициллинрезистентным Staphylococcus aureus, у больных муковисцидозом Резюме Актуальность. Отсутствие системы эпидемиологического надзора за хронической инфекцией легких (ХИЛ) у больных муковисцидозом (МВ) сделало бесконтрольным распространение возбудителей ХИЛ среди больных МВ в стационарах, о чем свидетельствовали многочисленные случаи инфицирования больных МВ, лечившихся в различных клиниках России. Цель исследования-определить направления эпидемиологического надзора (ЭН) за ХИЛ у больных муковисцидозом и профилактических мероприятий, необходимых для противодействия перекрестному инфицированию больных МВ и распространению доминирующих возбудителей хронической инфекции легких в стационаре. Материалы и методы. В статье проанализированы данные, полученные нами в результате исследований эпидемиологических и микробиологических особенностей ХИЛ у больных муковисцидозом. Использовали эпидемиологические, бактериологические и молекулярно-генетические (ПЦР, мультилокусное секвенирование, секвенирование полного генома) методы исследования. Результаты и обсуждение. Основываясь на результатах исследований эпидемиологических и микробиологических особенностей инфекций, вызванных вышеуказанными возбудителями, были определены направления ЭН и профилактических мероприятий при МВ. Обоснованы задачи информационно-аналитического блока, включающего мониторинг заболеваемости и микробиологический мониторинг. Установлено, что в рамках микробиологического мониторинга необходимо проводить бактериологическое исследование биоматериала из дыхательных путей больных МВ не реже чем 1 раз в квартал, а также при каждом амбулаторном посещении и госпитализации. Показана необходимость: исследования фенотипических свойств возбудителей, способствующих длительной персистенции в организме больного МВ; определения и мониторинга антибиотикочувствительности микроорганизмов, выделенных от больного в динамике; исследования гипермутабельности. Одной из основных задач мониторинга является молекулярно-генетический анализ возбудителей методом ПЦР с целью внутривидовой идентификации, типирования возбудителей и выявления эпидемических маркеров и клонов (в том числе и международных), идентификации генов детерминант антибиотикорезистентности. Выводы. Внедрение ЭН за хронической инфекцией легких позволит улучшить качество этиологической диагностики, своевременно выявлять источники инфекций и предупреждать распространение возбудителей ХИЛ среди больных МВ как в стационарах, так и во вне госпитальных условий, а также оптимизировать тактику антимикробной терапии ХИЛ. Основными направлениями предупреждения распространения возбудителей ХИЛ должны быть разделение потоков...

The aim of this study was to evaluate prevalence of chronic rhinosinusitis (CRS) and nasal polyps in adult patients with cystic fibrosis (CF) in Russian Federation. Additionally, we investigated the clinical course of CRS and developed the optimal therapeutic strategy.Methods. Three hundred and forty eight CF patients were involved in the study. Physical examination, computed tomography (CT) of paranasal sinuses and audiometry, if needed, were used. CRS and bilateral nasal polyps were diagnosed in 28 patients. Nasal endoscopy, SNOT-20 questionnaire, rhinomanometry, micro - biological examination of sputum and mucus from paranasal sinuses (obtained during puncture or surgery), spirometry, and measurement of serum markers of inflammation were used. Endoscopic sinus surgery was used in 14 patients (the group 1) and others were treated non-surgically (the group 2). Both group were treated during 6 months using intranasal mometasone, mucolytics and antibiotics via PARI SINUSTM nebulizer.Results. An improvement in symptoms, CT signs, rhinomanometry parameters and endoscopic signs was seen in both groups after treatment and was more prominent in the surgical treatment group compared to the non-surgical treatment group. Bacterial load reduction in nasal sinuses, decrease in the rate of pulmonary disease exacerbations, and an improvement in oxygen blood saturation were found in the surgical treatment group only. Treatment of CRS did not affect lung function, sputum microbiology and serum inflammatory markers.Conclusion. Endoscopic sinus surgery followed by intranasal mucolytics and antibacterials is an effective and well-tolerated treatment in adult CF patients with CRS.

РезюмеВажнейшим прогностическим фактором при муковисцидозе (МВ) является характер респираторной инфекции. В России разнообра зию микробного пейзажа нижних дыхательных путей у больных МВ посвящены единичные работы на ограниченных выборках боль ных. Общий анализ на большой группе пациентов в рамках единого регистра ранее не проводился. Цель. Выявление особенностей хро нической инфекции респираторного тракта у больных МВ в России по данным национального Регистра. Материалы и методы. Сведе ния о пациентах (n = 2 131: живых -2 092; умерших -39) из 74 регионов России, состоящих в национальном Регистре больных МВ (2014). Медиана возраста пациентов -10,2 (15,2) года, доля взрослых (не моложе 18 лет) -29,2 %. Проанализирована часть Регистра, посвященная микробиологическим показателям: наличие хронической инфекции, вызванной бактериями Staphylococcus aureus, Pseudo monas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia соmplex, нетуберкулезными микобактериями и непсевдомонадной гра мотрицательной флорой (НПГОФ) (включая Achromobacter spp.). Также оценена частота интермиттирующего высева P. aeruginosa. Результаты. У 18,0 % больных ни один из исследуемых микроорганизмов не обнаружен. Частота инфицирования дыхательных путей различной флорой представлена в порядке убывания: S. aureus -54,5 %, P. aeruginosa (хроническое инфицирование) -32,1 %, P. aerug inosa (интермиттирующий высев) -14,1 %, B. cepacia complex -7,3 %, Achromobacter spp. -3,5 %, S. maltophilia -3,3 %, нетуберкулезные