Production of extracellular protease by a Brazilian strain of Beauveria bassiana reactivated on coffee berry borer, Hypothenemus hampei

Ito, Eliana Tiemi; Varéa-Pereira, Geni; Miyagui, Dalva Tomoe; Pinotti, Maria Helena Pimenta; Neves, Pedro Manoel Oliveira Janeiro

doi:10.1590/s1516-89132007000200006

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“…Carbon and nitrogen sources are important variables that affect the growth and products of microbes [30]. Many authors had reported variability of carbon and nitrogen sources with different microorganisms [31][32][33]. Shafee et al [30] had reported that maximum protease was produced in medium containing glucose and beef extract, which was similar to our findings with S. albolongus.…”

Section: Discussionsupporting

confidence: 87%

Effects of Cultural Conditions on the Production of Extracellular Protease by Streptomyces albolongus and Streptomyces aburaviensis

N¹

2013

Enz Eng

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Proteolytic activity of two isolates of actinomycetes, Streptomyces albolongus and Streptomyces aburaviences was investigated on the basis of their ability to hydrolyze skimmed milk casein, egg albumin and gelatin. Both isolates were found to have potential for extracellular proteases production. Effects of culture conditions for the production of extracellular protease from S. albolongus and S. aburaviensis were determined. Highest protease yield from S. albolongus was obtained after 5 days of incubation with an initial p H 7, at static state when inoculated in medium composed of 1% glucose, 2% beef extract, 0.2% yeast extract, 0.1% KH 2 PO 4 , 0.3% K 2 HPO 4 , and trace MgSO 4 .7H 2 O. Optimum incubation conditions for S. abureviences were 4 days, with an initial medium p H 8 at shaking condition (100 rpm). S. aburaviences preferred 1.5% lactose and 1.5% tryptone as a carbon and nitrogen source. Both the isolates showed maximum protease yield at 37°C. The result of the present study might be helpful for largescale production of extracellular protease from these Streptomyces spp.

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Section: Discussionsupporting

confidence: 87%

Effects of Cultural Conditions on the Production of Extracellular Protease by Streptomyces albolongus and Streptomyces aburaviensis

N¹

2013

Enz Eng

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“…To high action of the fungus, is it possible the aqueous extract may have enriched the culture medium providing a greater quantity of compounds to be assimilated by fungus and the fungus' rapid metabolism increased the production of extracellular proteases, and therefore, unlike that observed with peracetic acid, the infectious process is accelerated and increased the percentage of mortality (Rombach, 1989;Leite et al, 2003;Ito et al, 2007).…”

Section: Insecticidal Activitymentioning

confidence: 99%

Effect of plant extracts and a disinfectant on biological parameters and pathogenicity of the fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae)

2016

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The fungus Beauveria bassiana is naturally found in poultry houses and causes high rates of mortality in Alphitobius diaperinus. Laboratory and field experiments have shown the potential of this fungus as an insect control agent. However, in poultry houses, bacteria as Salmonella, can be found and have been studied alternative control methods for this pathogen. Thus, this study aimed to evaluate the effect of plant extracts and a disinfectant on the fungus Beauveria bassiana (strain Unioeste 4). Conidial viability, colony-forming unit (CFU) counts, vegetative growth, conidia production, insecticidal activity of the fungus and compatibility were used as parameters in the evaluation of the effect of these products on the fungus. Alcoholic and aqueous extracts of jabuticaba (Myrciaria cauliflora (Mart.), guava (Psidium guajava (L.)), and jambolan (Syzygium cumini (L.), at concentrations of 10% as well as the commercial disinfectant, Peroxitane  1512 AL, were evaluated at the recommended concentrations (RC), 1:200 (RC), 0.5 RC and 2 RC. There was a negative influence of alcoholic and aqueous extracts of jabuticaba, guava and three dilutions of Peroxitane on the viability of conidia. The CFUs and vegetative growth of the fungus were affected only by the Peroxitane (all dilutions). For conidial production, the aqueous extract of guava had a positive effect, increasing production, while the Peroxitane at the R and RC concentrations resulted in a negative influence. The mortality of A. diaperinus, caused by the fungus after exposure to these products, was 60% for the peracetic acid at 0.5 RC, and above 80% for the extracts. Thus, the results showed that all the extracts and Peroxitane at RC 0.5 are compatible with the fungus B. bassiana Unioeste 4, however only the extracts had a low impact on inoculum potential. Keywords: Myrciaria cauliflora), na concentração de 10% e também o desinfetante comercial Peroxitane  1512 AL na concentração recomendada -1:200 (CR), 0,5 CR e 2CR. Foram avaliados a: germinação dos conídios, unidades formadoras de colônias (UFC), crescimento vegetativo, produção de conídios e efeito sobre a atividade inseticida do fungo contra adultos de A. diaperinus, bem como a compatibilidade entre produtos e o fungo. Verificou-se influência negativa dos extratos alcoólico e aquoso de jabuticabeira, goiabeira e das três diluições de Peroxitane sobre a viabilidade dos conídios. Já, a UFC e o crescimento vegetativo foram afetados apenas com Peroxitane (em todas as diluições). Para produção de conídios, o extrato aquoso de goiabeira teve efeito positivo, elevando a produção, enquanto as diluições recomendada e o dobro de Peroxitane mostraram influência negativa. Observou-se ainda que a mortalidade de A. diaperinus causada pelo fungo após a exposição aos produtos foi de 60% para o ácido peracético na 0,5 CR, já para os extratos foi acima de 80%. Assim, os resultados demonstraram que todos os extratos e o Peroxitane na 0,5 CR são compatíveis com o fungo B. bassiana Unioeste 4, porém apenas os extratos...

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“…Foram realizados cultivos submersos da cepa de B. bassiana CG432 a 28ºC, 150rpm através da inoculação de 1% de uma suspensão contendo 10 8 conídios/mL recém-ativados em broca-do-café utilizando meio de cultura líquido com a mesma composição do meio sólido, porém sem adição de ágar e preparado conforme descrito por Ito et al (2007), porém aumentando a relação espaço aéreo/ meio de cultivo para 1/5. Todos os cultivos foram realizados em triplicata.…”

Section: Produção E Isolamento Das Quitinasesunclassified

“…B. bassiana cepa CG432 isolada de insetos mortos Hemiptera: Membracidae na região nordeste do Brasil, demonstrou elevado crescimento sobre adultos de broca do café Hypothenemus hampei (Ferrari) HIROSE, 2005), e rápida produção de proteases extracelulares em apenas 2 dias de cultivo inoculado com suspensão de conídios previamente ativados em seu hospedeiro (ITO et al, 2007), sendo este tempo de produção de proteases, muito inferior aos publicados por cultivos de B. Bassiana realizados em meio enriquecidos com substratos protéicos como gelatina e caseína (URTZ; RICE, 2000) ou com cutícula moída de gafanhoto (St LEGER et al, 1986a).…”

unclassified

Avaliação de parâmetros cinéticos de quitinases produzidas por Beauveria bassiana (Bals.) Vuill.

et al. 2008

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ResumoBeauveria bassiana é um fungo entomopatogênico utilizado no controle biológico de insetos-praga que infestam produtos agrícolas. O mecanismo de infecção envolve a produção de enzimas extracelulares, como proteases e quitinases que degradam a cutícula dos insetos. O objetivo deste trabalho foi avaliar parâmetros cinéticos de pH, temperatura, concentração iônica e tempo de reação sobre a atividade de quitinases. O fungo B. bassiana CG432 foi repicado em broca do café Hypothenemus hampei (Ferrari) e utilizado para preparar o inóculo contendo 10 8 conídios ativados/mL. Estes conídios foram inoculados 1% (v/v) em meio de cultura líquido constituído por D-glicose (10g), extrato de levedura (5g), NaNO 3 (1,58g) , Na 2 HPO 4 .7H 2 O (1,05g), KCl (1g), MgSO 4 .7H 2 O (0,6g) e KH 2 PO 4 (0,36g) por litro. O cultivo foi conduzido a 28°C e 180rpm durante 5 dias. O fluido extracelular do cultivo foi obtido por filtração e centrifugação a 8.000g, e as quitinases foram isoladas e concentradas por ultrafiltração entre membranas de 10 e 100kDa sob pressão de nitrogênio. A atividade das quitinases foi determinada pela quantificação da N-acetilglicosamina liberada pela hidrólise da quitina coloidal durante 60 minutos de incubação a temperaturas de 40 a 60ºC, concentrações iônicas dos tampões acetato de sódio pH 4,0 a 6,0; fosfato de sódio pH 6,0 a 8,0; e glicina-NaOH pH 8,0 a 10,0, a 50, 100 e 200 mM. A atividade das quitinases foi máxima a 45ºC, em pH 5,5, mas também foi elevada em pH 6,0 e 8,5 em concentração iônica de 50mM. A atividade de quitinases aumentou durante uma hora de incubação demonstrando estabilidade das enzimas nas condições ótimas da reação. Palavras-chave: Fungos entomopatogênicos; Biocontrole; Hypothenemus hampei. AbstractEntomopathogenic fungus Beauveria bassiana is currently used as a biocontrol agent for agricultural pests. The infection process involves extracellular enzymes such as proteases and chitinases that degrade the cuticle of the insects. The objective of this work was to evaluate kinetic parameters of pH, temperature, ionic concentration and time of reaction on chitinases activity. The fungus B. bassiana CG432 was cultivated on coffee berry borer Hypothenemus hampei (Ferrari) and the conidia grown on insect were used to prepare the inoculum containing 10 8 conídia/mL. These conidia were inoculated at 1% (v/v) in

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Production of extracellular protease by a Brazilian strain of Beauveria bassiana reactivated on coffee berry borer, Hypothenemus hampei

Abstract: ABSTRACT

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Effects of Cultural Conditions on the Production of Extracellular Protease by Streptomyces albolongus and Streptomyces aburaviensis

Effects of Cultural Conditions on the Production of Extracellular Protease by Streptomyces albolongus and Streptomyces aburaviensis

Effect of plant extracts and a disinfectant on biological parameters and pathogenicity of the fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae)

Avaliação de parâmetros cinéticos de quitinases produzidas por Beauveria bassiana (Bals.) Vuill.

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