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ABSTRACT

ABSTRACT. Obesity is one of the most important nutritional disorders, and can be currently considered as an epidemic. Although there are few weight reduction drugs available on the market, some new drug candidates have been proposed, including Cordia ecalyculata, a Brazilian plant with anorectic properties, and Spirulina maxima, a cyanobacterium with antioxidant and anti-genotoxic activity. In this study, we evaluated the mutagenic potential of C. ecalyculata at doses of 150, 300, and 500 mg/kg alone and in association with S. maxima at doses of 75, 150, and 250 mg/kg, respectively, through an in vivo micronucleus test, using mice of both sexes, and an in vitro micronucleus test and comet assay, using human peripheral blood. For all tests, cyclophosphamide was used as a positive control. The results showed that treatment of 300 mg/kg C. ecalyculata and the combination treatment of 500 mg/kg C. ecalyculata with 250 mg/kg S. maxima resulted in anorectic effects. The mutagenic tests did not reveal any clastogenic or genotoxic activity for any treatment, indicating that these candidates could be marketed as weight-reduction drugs. Moreover, the drugs contain chemo-preventive substances that can protect against tumorigenesis, which has been associated with obesity.

Identificação de proteases produzidas pelo fungo entomopatogênico ResumoConídios de fungos entomopatogênicos atravessam o exoesqueleto do inseto pela ação mecânica do tubo germinativo e produção de múltiplas isoformas de proteases, quitinases e lipases em resposta à composição da cutícula do inseto. Desta forma o objetivo deste trabalho foi extrair, purificar e caracterizar a estrutura de proteases produzidas em cultivo submerso por Beauveria bassiana CG432 previamente ativada em adultos vivos de broca-do-café (Hypothenemus hampei). Uma suspensão contendo 10 6 conídios ativados/mL foi inoculada em meio de cultura líquido a 28ºC, 150 rpm por 3 dias. O extrato de proteases (EP) foi obtido da centrifugação a 8000 g por 20 minutos, fracionado e concentrado por ultrafiltração em membrana de porosidade controlada 100 kDa e 3 kDa, respectivamente. A cromatografia de gel filtração em Sephadex G-100 separou um pico proteico (Pico II) que apresentou 56% de resíduos do aminoácido ácido aspártico quando analisado por HPLC em coluna de fase reversa ODS-C18; atividade específica 43 vezes superior ao EP sobre soro albumina bovina; atividade de protease tipo-subtilisina e uma única banda proteica revelada por nitrato de prata e Coomassie Brilhant Blue em zimograma sobre gelatina por eletroforese PAGE em condições nativas. A homogeneidade do Pico II foi confirmada pela revelação de uma única banda durante a determinação do pH isoelétrico igual a 4,5, porém a determinação da massa molecular separou 2 bandas de 23 e 26 kDa por eletroforese PAGE-2D. As proteases foram caracterizadas como serino proteases com resíduo cisteína importante para a atividade, pois foram inibidas por fluoreto fenil-metil-sufonil e ácido p-cloromercúriobenzóico. As proteases do Pico II apresentaram Km 4x10 -4 sobre substrato tipo-subtilisina.