Recebido em 7/12/01; aceito em 11/7/02 APPLICATION OF MICROBIAL LIPASES TO CONCENTRATE POLYUNSATURATED FATTY ACIDS. Several polyunsaturated fatty acids (PUFA) belonging to the ômega 6 series, such as cis-6,9,12 γ-linolenic acid, as well as those of the ômega 3 series, such as cis -5,8,11,14,17-eicosapentaenoic acid and cis-4,7,10,13,16,19-docosahexaenoic acid are of considerable interest due to their nutritional and therapeutic properties. Methods used for the concentration of PUFA from natural sources include urea adduct formation, solvent winterization, supercritical fluid extraction and lipase-catalyzed reaction. Lipases are known to have little reactivity on PUFA and these acids can be enriched by selective hydrolysis, direct esterification of glycerol with PUFA and interesterification. Since lipase reactions are advantageous with respect to fatty acid, positional specificities and mild incubation condition, these enzymes are considered to be suitable for the production of PUFA concentrates for medical purposes.Keywords: polyunsaturated fatty acid; lipase; fatty acid selectivity. INTRODUÇÃOA importância dos ácidos graxos essenciais (ácido linoléico e ácido α-linolênico) na dieta humana foi assunto de grande interesse nas décadas passadas. Estes ácidos que contém duas ou mais insaturações são chamados poliinsaturados e representados por sím-bolos numéricos, como C18:2 (9,12) que representa o ácido linoléico e o C18:3 (9,12,15), o ácido α-linolênico, sendo que o número justaposto ao símbolo C indica o número de átomos de carbono e o segundo número, a quantidade de duplas ligações. A posição da ligação dupla na cadeia hidrocarbonada é indicada entre parênteses, pela identificação do átomo de carbono mais próximo da carboxila implicado na respectiva insaturação. Os ácidos graxos também podem ser divididos em famílias ou séries, dependendo da localização da última ligação dupla em relação ao seu grupamento metílico terminal: família ômega-6 (ω6) representada pelo ácido linoléico e a família ômega-3 (ω3), pelo ácido α-linolênico.Esses dois tipos de ácidos graxos são chamados essenciais porque não podem ser sintetizados pelo organismo humano e devem ser fornecidos através da dieta. Após a ingestão, os ácidos graxos, uma vez absorvidos por células e tecidos, podem ser dessaturados e alongados a outros ácidos poliinsaturados de cadeia longa 1 . Os processos de alongação e dessaturação do ácidos linoléico e α-linolênico ocorrem nos animais e, vagarosamente, nos homens originando diversos metabólitos, como representado na Figura 1. Na atualidade, pesquisas têm enfatizado o importante papel dos metabólitos poliinsaturados, tais como ácido γ-linolênico (18:3 (6,9,12)) da família ω6, ácido eicosapentaenóico (20:5 (5,8,11,14,17)) e ácido docosaexaenóico (22:6 (4,7,10,13,16,19)) da família ω3, representados por EPA e DHA, respectivamente.Os diversos dos ácidos graxos poliinsaturados (AGPI) no metabolismo de lipoproteínas, síntese de eicosanóides e funcionamento das plaquetas e das paredes dos vasos, os tornam de especial i...
Matricaria chamomilla L. contains antioxidant flavonoids that can have their bioactivity enhanced by enzymatic hydrolysis of specific glycosyl groups. This study implements an untargeted metabolomics approach based on ultra-performance liquid chromatography coupled with electrospray ionisation quadrupole time-of-flight mass spectrometry technique operating in MSE mode (UPLC-QTOF-MSE) and spectrophotometric analysis of chamomile aqueous infusions, before and after hydrolysis by hesperidinase and β-galactosidase. Several phenolic compounds were altered in the enzymatically treated infusion, with the majority being flavonoid derivatives of apigenin, esculetin, and quercetin. Although enzymatically modifying the infusion only led to a small increase in antioxidant activity (DPPH• method), its inhibitory effect on pancreatic lipase was of particular interest. The enzymatically treated infusion exhibited a greater inhibitory effect (EC50 of 35.6 µM) than unmodified infusion and kinetic analysis suggested mixed inhibition of pancreatic lipase. These results are of great relevance due to the potential of enzymatically treated functional foods in human health.
Três lipases microbianas nativas (Aspergillus niger, Rhizopus javanicus e Penicillium solitum) foram utilizadas na hidrólise do óleo de salmão (teor de AGPI n-3 de 30,1%) com o objetivo de concentrar o conteúdo de ácidos graxos poliinsaturados n-3 (AGPI n-3) nos acilgliceróis residuais. A metodologia de planejamento experimental e análise de superfície de resposta foi usada para se chegar às condições otimizadas de cada reação enzimática, utilizando as seguintes variáveis; temperatura (X 1), quantidade de lipase (X 2) e taxa de água/óleo (X 3). Com base nos resultados do planejamento, a lipase de Aspergillus niger foi a mais eficiente na concentração dos AGPI n-3, sendo que as condições ótimas de reação foram: concentração de enzima de 500 U g-1 óleo, temperatura 45 °C e taxa de água/óleo de 2:1 m/m após 24 h de reação. O grau de hidrólise (60%) conduziu a um aumento do conteúdo de ácido docosahexaenóico (DHA) de 14,4% para 34,0% (enriquecimento de 2,4 vezes) nos acilgliceróis residuais após a hidrólise do óleo de salmão. In an attempt to concentrate the content of n-3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFA) in the residual acylglycerol, salmon oil (n-3 PUFA content of 30.1%) was hydrolyzed with three kinds of native microbial lipases (Aspergillus niger, Rhizopus javanicus and Penicillium solitum). For each lipase, a response surface methodology was used to obtain maximum PUFA content and to optimize the parameters of enzymatic reactions with respect to important reaction variables; temperature (X 1), amount of lipases (X 2) and water/oil ratio (X 3). Based on these results, optimal reaction conditions were established. Aspergillus niger lipase was the most effective in concentrating n-3 PUFA. The degree of hydrolysis (60%) led to an increase in the docosahexaenoic acid (DHA) content from 14.4% in the original oil to 34.0% (2.4-fold enrichment) in the residual acylglycerol under optimum conditions: enzyme concentration of 500 U g-1 oil, reaction temperature of 45 °C and water/oil mass rate of 2:1 (m/m) after 24 h reaction.
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